Qiagen203601/203603/203605/203607/203609

快速、高特異性擴增，適合多種應(yīng)用

• 高特異性PCR，所需優(yōu)化次數(shù)少

• 快速激活熱啟動酶，只需5分鐘

• 即用型PCR上樣緩沖液，操作更簡單快速

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該聚合酶具備高特異性、高靈敏度，HotStarTaq DNA Polymerase所需的優(yōu)化次數(shù)少，激活時間為5分鐘。可在室溫下構(gòu)建PCR反應(yīng)體系，且反應(yīng)產(chǎn)物可直接上樣至凝膠，因為新型的CoralLoad PCR緩沖液包含兩種凝膠示蹤染料。同時提供標(biāo)準(zhǔn)QIAGEN PCR緩沖液，便于操作。此外，一種新型的添加劑Q-Solution可確保高效擴增難擴增的模板（如富含GC的模板）。*的試劑盒組成和經(jīng)優(yōu)化的實驗方案使PCR流程更加高效。

Performance

每一批HotStarTaq Plus DNA Polymerase都經(jīng)過*的質(zhì)量控制測試，包括：嚴(yán)格的PCR特異性和重復(fù)性分析，即使低拷貝的靶分子也可擴增。通過檢測，HotStarTaq Plus DNA Polymerase優(yōu)于其它供應(yīng)者提供的試劑盒，確保高度特異性和在熱啟動PCR中的表現(xiàn)（參見"Highest specificity"、"Higher specificity with different primer–template systems"和表格）。該試劑盒提供的新型PCR緩沖液使得在多種PCR條件下都維持高特異性，無需優(yōu)化。Q-Solution可進一步優(yōu)化PCR，且該試劑盒中提供（參見"Amplification of difficult templates"）?？傊@些組合確保了在多種應(yīng)用中的特異性擴增（參見"Effect of hot start on RT-PCR performance"和"Highly sensitive single-cell PCR"）。

HotStarTaq Plus DNA Polymerase特性

濃度：5 units/µl
重組酶：是
底物類似物：dNTP、ddNTP、dUTP、biotin-11-dUTP、DIG-11-dUTP、fluorescent-dNTP/ddNTP
延伸速度：72°C條件下2–4 kb/min
酶半衰期：97°C條件下10 min，94°C條件下60 min
擴增效率：≥10⁵倍
5'–>3'外切酶活性：是
額外添加A：是
3'–>5' 外切酶活性：否
核酸酶污染：否
蛋白酶污染：否
RNases污染：否
自啟活性：否

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Principle

HotStarTaq Plus DNA Polymerase具備同HotStarTaq DNA Polymerase一樣的表現(xiàn)，激活時間只需5分鐘。

HotStarTaq Plus DNA Polymerase，是一種經(jīng)修飾的QIAGEN Taq DNA Polymerase，以非活性形式提供，常溫下沒有聚合酶活性。避免PCR構(gòu)建和循環(huán)初始階段低溫條件下非特異性引物的延伸和引物二聚體的形成（參見"Highest specificity"和"Higher specificity with different primer-template systems"）。95°C條件下孵育5分鐘即可激活HotStarTaq Plus DNA Polymerase，這個步驟可整合入已有的熱循環(huán)程序中。

QIAGEN PCR Buffer

QIAGEN PCR Buffer通過提高每個PCR擴增退火過程特異性引物的結(jié)合比例，確保PCR每個循環(huán)特異性擴增（參見"Increased specificity of primer annealing"）。*的KCl和(NH₄)₂SO₄平衡組合，使得該緩沖液與傳統(tǒng)的PCR緩沖液相比在很寬的溫度和Mg²⁺濃度范圍內(nèi)都有嚴(yán)格的引物退火條件和高度的特異性，無需進行耗時的優(yōu)化。

CoralLoad PCR Buffer

HotStarTaq Plus DNA Polymerase同時提供CoralLoad PCR Buffer，CoralLoad PCR Buffer具備QIAGEN PCR Buffer的所有優(yōu)點，同時可直接將PCR產(chǎn)物上樣到瓊脂凝膠上，無需加入凝膠上樣緩沖液。CoralLoad PCR Buffer具備同樣高的PCR特異性，與常規(guī)的QIAGEN PCR Buffer一樣可減少優(yōu)化過程。此外，它包含兩種指示染料，橙色染料和紅色染料，可方便的判斷DNA的遷移距離和優(yōu)化跑膠時間（參見"CoralLoad PCR Buffer"）。該緩沖液提高移液的可見性，并可直接將PCR產(chǎn)物上樣至凝膠，提高便利性。

Q-Solution

該產(chǎn)品同時提供Q-Solution，一種新型的PCR添加劑，通過修飾DNA熔解行為促進難擴增模板的擴增。這種*的試劑可進一步優(yōu)化由模板引起的表現(xiàn)不理想的PCR，如過多的二級結(jié)構(gòu)和富含GC的模板（參見"Amplification of difficult templates"）。不同于DMSO和其他PCR添加劑，Q-Solution的濃度是確定的，沒有*性，并且保證PCR的純度。而且PCR中加入Q-Solution不會影響PCR的準(zhǔn)確性。

Procedure

HotStarTaq Plus DNA Polymerase提供高效、經(jīng)優(yōu)化的實驗方案，用于快速、方便的構(gòu)建PCR反應(yīng)體系。95°C條件下孵育5分鐘激活HotStarTaq DNA Polymerase，可以整合入已有的熱循環(huán)程序。反應(yīng)可在室溫下建立，更加方便和易于使用（參見"HotStarTaq Plus procedure"）。該試劑盒同時提供CoralLoad PCR Buffer，提高移液的可見性，并可直接將PCR產(chǎn)物上樣至凝膠，提高便利性。

Applications

HotStarTaq Plus DNA Polymerase適合多種應(yīng)用，包括各種富有挑戰(zhàn)性的研究，如各種擴增應(yīng)用：

• 復(fù)雜的基因模板

• 復(fù)雜的cDNA模板（如RT-PCR）

• 低拷貝的靶分子（如單細(xì)胞PCR）

• 多重引物對反應(yīng)