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北京諾博萊德科技有限公司

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91511PAX Blood microRNA Kit 核酸提取

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  • 北京諾博萊德科技有限公司
  • 2025-04-18 16:54:13
  • 北京市
  • 北京
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【簡(jiǎn)單介紹】

品牌 NobleRyder/諾博萊德 貨號(hào) 91511
規(guī)格 50次 供貨周期 現(xiàn)貨
主要用途 用于從儲(chǔ)存在保存試劑和PAXgene?中的血液樣品中分離總RNA>18個(gè)核苷酸 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
PAX Blood miRNA Kit設(shè)計(jì)用于從儲(chǔ)存在保存試劑和PAXgene®中的血液樣品中分離總RNA>18個(gè)核苷酸(包括miRNA);血液 RNA 管。該程序可wan全去除污染物和酶抑制劑,從而產(chǎn)生高質(zhì)量的 RNA。使用 PAX Blood miRNA 試劑盒純化的 RNA 可直接用于 RT-PCR 等應(yīng)用。
PAX Blood microRNA Kit 核酸提取

【詳細(xì)說明】

PAX Blood miRNA Kit (For PAXgene Blood RNA Tube)


PAX Blood microRNA Kit   核酸提取

目錄號(hào):91511

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

PAX Blood miRNA Kit設(shè)計(jì)用于從儲(chǔ)存在保存試劑和PAXgene®中的血液樣品中分離總RNA>18個(gè)核苷酸(包括miRNA);血液 RNA 管。該程序可wan全去除污染物和酶抑制劑,從而產(chǎn)生高質(zhì)量的 RNA。使用 PAX Blood miRNA 試劑盒純化的 RNA 可直接用于 RT-PCR 等應(yīng)用。

從保存試劑中取出樣品。對(duì)于儲(chǔ)存在 PAXgene 中的血液樣本®血液 RNA 管,通過離心收集細(xì)胞。樣品在含有蛋白酶 K 的優(yōu)化緩沖液下洗滌和裂解。將樣品離心以去除細(xì)胞碎片和其他顆粒。用異丙醇調(diào)整結(jié)合條件后,將樣品上樣到 RNA 結(jié)合柱上。通過短暫的離心或真空步驟,樣品通過結(jié)合 RNA/miRNA 的柱基質(zhì)。經(jīng)過三個(gè)洗滌步驟后,用不含 RNase 的水洗脫純化的 RNA/miRNA。

產(chǎn)品特點(diǎn)

配套PAXgene采血/RNA保存管提取血液microRNA

Kit Contents and Storage

Kit Contents

Storage

50 Preps (91511-50)

Resuspension Buffer

RT

20 ml

Binding Buffer

RT

50 ml

WashSolution 1

RT

12 ml

Add indicated ethanol before first use

WashSolution 2/3

RT

10 ml

Add indicated ethanol before first use

RNase-free H2O

RT

10 ml

DNase Buffer

–20 °C

1.25 ml x 2

RNase free DNase I

–20 °C

250 μl

Proteinase K

(20mg / ml)

–20 °C

20 mg x 1 tube

RNA

Binding Columns

RT

50

注意:蛋白酶 K 是一種凍干物。離心幾秒鐘,然后用 1 ml 蒸餾水等分溶液復(fù)溶。在 –20 °C 下儲(chǔ)存。 避免反復(fù)凍融。所有試劑在指ding溫度下儲(chǔ)存時(shí),可穩(wěn)定保存 9 個(gè)月。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)


描述
PAX Blood miRNA Kit設(shè)計(jì)用于從儲(chǔ)存在保存試劑和PAXgene® Blood RNA Tube中的血液樣本中分離總RNA>18個(gè)核苷酸(包括miRNA)。該程序可wan全去除污染物和酶抑制劑,從而產(chǎn)生高質(zhì)量的 RNA。使用 PAX Blood miRNA 試劑盒純化的 RNA 可直接用于 RT-PCR 等應(yīng)用。

從保存試劑中取出樣品。對(duì)于儲(chǔ)存在 PAXgene® Blood RNA Tubes 中的血液樣本,通過離心收集細(xì)胞。樣品在含有蛋白酶 K 的優(yōu)化緩沖液下洗滌和裂解。將樣品離心以去除細(xì)胞碎片和其他顆粒。用異丙醇調(diào)整結(jié)合條件后,將樣品上樣到 RNA 結(jié)合柱上。通過短暫的離心或真空步驟,樣品通過結(jié)合 RNA/miRNA 的柱基質(zhì)。經(jīng)過三個(gè)洗滌步驟后,用不含 RNase 的水洗脫純化的 RNA/miRNA。

用戶提供的材料和設(shè)備:

1. 微量離心機(jī)的離心能力為 13,000 x g

2. 100% 異丙醇

3. 不含 RNase 的過濾移液器吸頭

4. 不含 RNase 的水

5. 1.5 或 2.0 ml 微量離心管

6. 搖動(dòng)培養(yǎng)箱或加熱塊,溫度可達(dá) 55°C、65°C

7. 帶水平轉(zhuǎn)子的離心機(jī),離心力可達(dá) 5,500 x g

注意:
     shou次使用前,將規(guī)定量的乙醇加入洗滌液中

溶液 1 和洗滌溶液 2/3 瓶,充分混合,并用勾號(hào)標(biāo)記瓶子。

將培養(yǎng)箱或加熱塊加熱至 55°C。

1. 使用水平轉(zhuǎn)子以 3,000-5,000 x g 的離心力離心 PAXgene® Blood RNA 管 10 分鐘。

2. 吸出并丟棄上清液。
     3. 加入 4 mL 不含 RNase 的水。渦旋以wan全重懸沉淀。
     4. 使用水平轉(zhuǎn)子以 3,000-5,000 x g 的離心力離心 PAXgene® Blood RNA Tube 10 分鐘。
     5. 吸出并丟棄上清液。

注意:不wan全去除上清液會(huì)降低裂解效率并稀釋裂解物,從而降低 RNA 產(chǎn)量。

6. 加入 350 μl 重懸緩沖液。渦旋以wan全重懸沉淀。
     7. 將樣品轉(zhuǎn)移到新的 1.5 ml 微量離心管中。
     8. 加入 300 μL 結(jié)合緩沖液和 20 μL 蛋白酶 K 溶液。渦旋 5 秒鐘以充分混合。

9. 使用振蕩培養(yǎng)箱在 55°C 下孵育 10 分鐘。
    10. 可選:將裂解物通過安裝在注射器上的 20 號(hào)針頭(直徑 0.9 mm)至少 5 次,或使用電子組織勻漿器勻漿。此步驟剪切基因組 DNA,降低裂解物的粘度,并提高產(chǎn)量。

11. 將勻漿以 13,000 rpm 離心 3 min。將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中。
     12. 加入等體積的 100% 異丙醇。渦旋充分混合。
     13. 將最多 700 μl 混合物轉(zhuǎn)移至 2 ml 收集管(提供)中的 RNA 結(jié)合柱中。

14. 以最大速度離心 1 分鐘。
     15. 吸出并丟棄濾液,重復(fù)使用收集管。
     16.重復(fù)步驟 13-15,直到剩余樣品轉(zhuǎn)移到 RNA 結(jié)合柱中。

17. 加入 350 μl 洗滌液 1.
     18. 以最大速度離心 1 分鐘。
     19. 吸出并丟棄濾液,重復(fù)使用收集管。
     20. 對(duì)于每個(gè) RNA 結(jié)合柱,準(zhǔn)備 DNase I 消化

反應(yīng)混合物如下:

Buffer

Volume per Prep

10 Preps

DNase I Buffer

45 μl

450 μl

RNase-free DNase I

5 μl

50 μl

Total volume

50 μl

500 μl

重要說明:
     • DNase I 非常敏感,容易發(fā)生物理變性。不要渦旋 DNase I 混合物。倒置試管輕輕混勻。
     • 在 RNA 分離之前新鮮制備 DNase I 儲(chǔ)備液。
     • 標(biāo)準(zhǔn) DNase 緩沖液與膜上 DNase I 消化不兼容。使用其他緩沖液可能會(huì)影響 RNA 與基質(zhì)的結(jié)合,并可能降低 RNA 產(chǎn)量和純度。

• 所有步驟必須在室溫下進(jìn)行??焖俚⌒牡毓ぷ鳌?/span>

21. 將 50 μl DNase I 消化反應(yīng)混合物直接移液到 RNA 結(jié)合柱的中心表面。

注意:確保將 DNase I 消化混合物直接移液到膜上。如果一些混合物保留在 RNA 結(jié)合柱的壁或 O 形圈上,則 DNase I 消化將不wan全

22. 在室溫下靜置 15 分鐘。
    23. 加入 350 μl 洗滌液 1.以最大速度離心 1 分鐘。
    24. 吸出并丟棄濾液,重復(fù)使用收集管。
    25. 加入 500 μl 洗滌液 2/3。以最大速度離心 1 分鐘。
    26. 吸出并丟棄濾液,重復(fù)使用收集管。
    27. 重復(fù)步驟 25-26 進(jìn)行第二個(gè)洗滌液 2/3 洗滌步驟。

28. 以最大速度離心空的 RNA 結(jié)合柱 2 分鐘,以干燥柱基質(zhì)。

注意:洗脫前干燥柱膜很重要。
殘留的乙醇可能會(huì)干擾下游應(yīng)用。

29. 將 RNA 結(jié)合柱轉(zhuǎn)移到 1.5 mL 微量離心管中。
     30. 將 50-70 μl 不含 RNase 的水直接加入到膜中心(可選:將水預(yù)熱至 70–90°C 將增加 RNA 產(chǎn)量)。在室溫下靜置 1 分鐘。
     31. 以最大速度離心 2 分鐘。

PAX Blood microRNA Kit   核酸提取


    
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