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  • 質(zhì)粒DNA的大量提取、純化及棉花的遺傳轉(zhuǎn)化

    實(shí)驗(yàn)試劑1.STE[0.1mol/LNaCI、10mmol/LTris-HCl(pH8.0),1mmol/LEDTA(pH8.0)]2.溶液I[50mmol/L蔗糖、25mmol/LTris-HCl(pH8.0),10mmol/LEDTA(pH8.0)]3.溶液II(0.4mol/LNaOH和2%SDS等量混勻)4.溶液III(3mol/LKac,pH4.8)5.異丙醇6.4mol/LLiCI7.RNase8.苯酚、酚-氯仿、氯仿9.乙醇實(shí)驗(yàn)設(shè)備1.搖床2.制冰機(jī)3.高速離心機(jī)4.水浴鍋5.超凈
  • 麻醉大鼠動(dòng)脈血壓的測(cè)定(直接測(cè)定法)

    實(shí)驗(yàn)試劑1.20%氨基甲酸乙酯(Urethane)注射液或者1.5%戊巴比妥鈉(PhentobarbitalSodium)注射液2.1%普魯卡因注射液3.0.3%肝素生理鹽水注射液實(shí)驗(yàn)設(shè)備1.常用實(shí)驗(yàn)器械一套2.家兔或者大鼠實(shí)驗(yàn)臺(tái)一個(gè)3.用于家兔或者大鼠的聚乙烯醫(yī)用塑料導(dǎo)管(家兔用導(dǎo)管外徑為2mm,內(nèi)徑為1.5mm;大鼠用導(dǎo)管外徑為1mm,內(nèi)徑為0.8mm)4.壓力換能器及其多通道生理信號(hào)采集記錄儀器實(shí)驗(yàn)材料家兔,體重為2kg左右;大鼠,體重為200~250g左右。實(shí)驗(yàn)步驟1.頸總動(dòng)脈測(cè)量動(dòng)脈血
  • 細(xì)胞傷口愈合實(shí)驗(yàn)

    實(shí)驗(yàn)試劑DMEM培養(yǎng)基胎牛血清PBSBD24孔細(xì)胞培養(yǎng)板Raininpipettips,1ml戊二醛乙醇結(jié)晶紫實(shí)驗(yàn)設(shè)備細(xì)胞培養(yǎng)儀:37°Cand5%CO2實(shí)驗(yàn)材料人MDA-MB-231cell實(shí)驗(yàn)步驟1.細(xì)胞在含有10%FBS的DMEM培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。2.細(xì)胞以一定密度接種到24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,生長(zhǎng)24小時(shí)后,單層細(xì)胞融合度應(yīng)達(dá)到70-80%。3.不要更換培養(yǎng)基。用新的1ml槍頭輕輕的在單層培養(yǎng)細(xì)胞間劃痕,劃痕橫穿過(guò)孔,槍頭盡量與板孔的底部垂直,不要傾斜。這樣產(chǎn)生的gap的距離才與槍頭末端的外直徑
  • 細(xì)胞計(jì)數(shù)與存活測(cè)試

    實(shí)驗(yàn)材料0.4%w/vtrypanblue(GibcoBRL15250-061)Erythosinbluishstain取0.1gramErythrosinbluish(SigmaE-9259)及0.05grampreservativemethylparaben(SigmaH-3647)溶于100mlCa/Mgfreesaline血球計(jì)數(shù)盤及蓋玻片(Hemocytometerandcoverslip)計(jì)數(shù)器(counter)低倍倒立顯微鏡粒子計(jì)數(shù)器(Coultercounter,CoulterE
  • 冷凍組織切片的制作

    實(shí)驗(yàn)試劑液氮,干冰,1%明膠,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀釋抗體,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗,DAB/金屬鹽試劑,3%過(guò)氧化氫,0.3%(W/V)氯化鎳貯存液,Harris蘇木精,乙醇實(shí)驗(yàn)設(shè)備載玻片,Whatman1#濾紙,低倍光學(xué)顯微鏡實(shí)驗(yàn)材料未受損傷的組織實(shí)驗(yàn)步驟1.將未受損傷的組織切剖成小樣本,約lcmXIcmX0.4cm。2.將標(biāo)本放在卡片的一端。標(biāo)記該卡片,將帶有標(biāo)本的一端浸入液氮中。60s后,取出標(biāo)本并放在干冰上。修剪卡片,使其大小剛好比組織塊稍
  • 麻醉家兔、大鼠中心靜脈壓的測(cè)定

    實(shí)驗(yàn)原理中心靜脈壓(centralvenouspressureCVP)是用來(lái)反映右心房?jī)?nèi)壓力變化的一個(gè)指標(biāo)。右心房?jī)?nèi)壓力的變化受到兩個(gè)因素的影響:*是上下腔靜脈回流的情況,比如大量失血或者丟失體液而發(fā)生低血容量性休克時(shí),回心血量明顯減少,右心房?jī)?nèi)壓力會(huì)降低,中心靜脈壓降低;第二是右心室內(nèi)壓力變化的情況,比如肺動(dòng)脈高壓時(shí),右心室內(nèi)壓也增高,右心房?jī)?nèi)血液進(jìn)入右心室受阻,右心房?jī)?nèi)壓增高,中心靜脈壓增高。實(shí)驗(yàn)試劑1.20%氨基甲酸乙酯注射液或者1.5%戊巴比妥鈉注射液2.1%普魯卡因注射液3.0.3%肝
  • 干擾素的制備及檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

    實(shí)驗(yàn)原理干抗素是干擾素誘生劑作用于有關(guān)生物細(xì)胞所產(chǎn)生的一類高活性、多功能蛋白質(zhì)。它從細(xì)胞產(chǎn)生和釋放出來(lái)以后,又作用于相應(yīng)的其它同種細(xì)胞,使其獲得抗病毒及抗腫瘤等多方面的免疫力。所謂干擾素誘生劑,是指能誘導(dǎo)有關(guān)生物細(xì)胞產(chǎn)生干擾素的一類物質(zhì)。能誘導(dǎo)有關(guān)生物細(xì)胞產(chǎn)生α和β干擾素者稱甲類干擾素誘生劑,如各種動(dòng)物病毒、細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物等;可誘導(dǎo)T細(xì)胞產(chǎn)生γ干擾素的稱為乙類干擾素誘生劑,如脂多糖、鏈球菌毒素、腸毒素A等。在實(shí)際工作中,制備干擾素多采用兩種方法。一是用干擾素誘生劑誘導(dǎo)某些生物細(xì)胞產(chǎn)生干擾素,
  • 煙草轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)流程

    實(shí)驗(yàn)材料煙草細(xì)胞:BY-2實(shí)驗(yàn)步驟1.BY-2細(xì)胞培養(yǎng)BY-2細(xì)胞懸浮培養(yǎng)在搖床上,避光,溫度260C,轉(zhuǎn)速130rpm,每7天將1ml細(xì)胞轉(zhuǎn)入20ml新鮮的液體培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。BY-2愈傷組織生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)基上,每3-4周繼代一次。轉(zhuǎn)基因的懸浮細(xì)胞和愈傷組織生長(zhǎng)在含相應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基中。2.用干轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌GV3101的準(zhǔn)備(1)接種農(nóng)桿菌單菌落到2ml新鮮的YEB液體培養(yǎng)基中,28“培養(yǎng)過(guò);(2)取200ul培養(yǎng)物加到l0ml新的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)3-4小時(shí):(3)'5000rpm,離心5m
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