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滅菌器使用和效果判斷
閱讀：1946發(fā)布時間：2015-7-23
滅菌器如何使用：首先在外層鍋內(nèi)加適量的水，將需要滅菌的物品放入內(nèi)層鍋，蓋好鍋蓋并對稱地扭緊螺旋。然后加熱使鍋內(nèi)產(chǎn)生蒸氣，當(dāng)壓力表指針達到 33.78kPa時，打開排氣閥，將冷空氣排出，此時壓力表指針下降，當(dāng)指針下降至零時，即將排氣閥關(guān)好。zui后繼續(xù)加熱，鍋內(nèi)蒸氣增加，壓力表指針又上升，當(dāng)鍋內(nèi)壓力增加到所需壓力時，將火力減小，按所滅菌物品的特點，使蒸氣壓力維持所需壓力一定時間，然后將滅菌器斷電或斷火，讓其自然冷后再慢慢打開排氣閥以排除余氣，然后才能開蓋取物 。
滅菌器林林總總，質(zhì)量參差不齊。國內(nèi)售賣的滅菌器，往往儀器指針達到所需的溫度，但滅菌物品的實際溫度卻未達到要求。導(dǎo)致滅菌物品不*，影響實驗結(jié)果。尤其是對無菌試驗培養(yǎng)基滅菌不*，直接關(guān)系到對藥品無菌試驗結(jié)果的判斷。使物品在滅菌后達到無菌要求，這是藥品實驗中的一個基本保證，也是滅菌器效果是否合格是實驗成敗的zui基礎(chǔ)zui關(guān)鍵的首要步驟?，F(xiàn)在我們就為您介紹簡易的滅菌效果驗證的方法。
1.試驗材料
① 嗜熱芽孢桿菌紙片；噬熱芽孢桿菌ATCC7053，含芽孢量5—105CFU/片
② 121℃壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡；溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基，116℃20分鐘高壓滅菌后備用。
③ 0—150℃留點溫度計
2.方法與結(jié)果
將嗜熱芽孢桿菌紙片用無菌鑷子放人密封試管中。化學(xué)指示卡和留點溫度計放人敞口的試管中。上兩種試管各準(zhǔn)備5—10份。分別放置在滅菌器蒸汽口處、底部排氣口處及底部水口處或上下左右中間5處。如壓力蒸汽滅菌器為二層，則需放10處。留點溫度計標(biāo)化合格后可用于驗證試驗。檢測前，需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測后留點溫度計的溫差應(yīng)在1℃之間，則說明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。滅菌后的菌片應(yīng)在嚴(yán)格無菌操作條件下放人滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)。56—60℃培養(yǎng)24-48小時，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說明菌片中的嗜熱芽孢桿菌尚未*滅活，細菌仍可在培養(yǎng)基中生長，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說明芽孢菌已滅活。同時要用未經(jīng)滅菌的紙片放人培養(yǎng)基內(nèi)作為陽性對照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對照?；瘜W(xué)指示卡上的指示色塊，在滅菌器滅菌時，由淡黃色變?yōu)楹谏?。隨著顏色變化的深淺，并與對照色相比，可判斷滅菌效果是否達到要求?；瘜W(xué)指示卡應(yīng)在干燥處保存。遇潮會變色，影響滅菌效果的觀測。滅菌器必須使蒸汽順利進入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達到滅菌的效果。要進行空載熱分布和滿載熱穿透力驗證(滿載時不超過總體積的2／3)。二種驗證各重復(fù)三次，共做六次表。5個點六次試驗表明溫度均在121 ℃，化學(xué)指示卡變黑；程度與對照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說明滅菌器效果合格。
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