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如何驗(yàn)證高壓滅菌鍋的滅菌方法
閱讀：5876發(fā)布時(shí)間：2015-12-23
高壓滅菌鍋的滅菌工作原理：
濕熱滅菌是物品放入密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)加熱，產(chǎn)生蒸汽，排除冷空氣后密閉，使蒸汽不溢出，增大壓強(qiáng)，使水的沸點(diǎn)升高，高于100℃，導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性達(dá)到目的 ,濕熱滅菌zui主要的設(shè)備就是高壓滅菌鍋。
常用高壓滅菌鍋主要有手提式高壓滅菌鍋、臺(tái)式高壓滅菌鍋、立式高壓滅菌鍋等幾種，種類不同，但使用基本相似，具體操作如下：
1、使用前應(yīng)了解并掌握高壓滅菌鍋的原理及操作規(guī)則，以及不正確使用導(dǎo)致災(zāi)難性后果，保障消毒滅菌的質(zhì)量，使用人員需經(jīng)過有關(guān)培訓(xùn)。
2、所有具有傳染性的廢物都應(yīng)該高壓滅菌。
3、 開始滅菌前所有物品必須貼有滅菌指示帶，廢物滅菌后可以看到滅菌是否*。
4、高壓滅菌鍋操作人員在使用高壓滅菌鍋時(shí)不得離開崗位，高壓滅菌鍋應(yīng)按照規(guī)定進(jìn)行安全和計(jì)量檢定，檢定合格方可投入使用，并應(yīng)注意日常維護(hù)保養(yǎng)。
5、高壓滅菌鍋內(nèi)的物品不得放的過滿，否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物質(zhì)后，高壓滅菌鍋的蓋子或門盡量擰緊。
6實(shí)驗(yàn)室高壓滅菌鍋由三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室管理員定期檢查，以確保高壓滅菌鍋正常工作，防止意外事故發(fā)生，保證消毒滅菌效果。
高壓滅菌鍋使物品滅菌后達(dá)到無菌要求，這是藥品實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)基本保證。高壓滅菌鍋滅菌效果是否合格是實(shí)驗(yàn)成敗的zui基礎(chǔ)zui關(guān)鍵的首要步驟。本文提供了進(jìn)行滅菌效果驗(yàn)證的一個(gè)簡(jiǎn)易的方法。
1 試驗(yàn)材料
嗜熱芽孢桿菌紙片；噬熱芽孢桿菌ATCC7053，含芽孢量5—105CFU片]121 oC壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡；溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基，116~C20分鐘高壓滅菌后備用。0—150 oC留點(diǎn)溫度計(jì)
2 方法與結(jié)果
將嗜熱芽孢桿菌紙片用無菌鑷子放人密封試管中?；瘜W(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計(jì)放人敞口的試管中。上兩種試管各準(zhǔn)備5—10份。分別放置在高壓滅菌鍋蒸汽口處、底部排氣口處及底部水口處或上下左右中間5處。如滅菌器為二層，則需放10處】。留點(diǎn)溫度計(jì)標(biāo)化合格后可用于驗(yàn)證試驗(yàn)。檢測(cè)前，需將溫度計(jì)的水銀柱甩至40℃以下。每次監(jiān)測(cè)后留點(diǎn)溫度計(jì)的溫差應(yīng)在1oC之間，則說明滅菌器內(nèi)的溫度分布是均勻的。滅菌后的菌片應(yīng)在嚴(yán)格無菌操作條件下放人滅菌后的溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基內(nèi)。56—60~C培養(yǎng)2448小時(shí)，觀察顏色變化。如培養(yǎng)基變?yōu)辄S色，說明菌片中的嗜熱芽孢桿菌尚未*滅活，細(xì)菌仍可在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養(yǎng)基顏色不變化仍為紫色，則說明芽孢菌已滅活。同時(shí)要用未經(jīng)滅菌的紙片放人培養(yǎng)基內(nèi)作為陽性對(duì)照，不加紙片的空白培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照。化學(xué)指示卡上的指示色塊，在高壓蒸汽滅菌時(shí)，由淡黃色變?yōu)楹谏?。隨著顏色變化的深淺，并與對(duì)照色相比，可判斷滅菌效果是否達(dá)到要求?；瘜W(xué)指示卡應(yīng)在干燥處保存。遇潮會(huì)變色，影響滅菌效果的觀測(cè)。高壓蒸汽滅菌必須使蒸汽順利進(jìn)入滅菌器內(nèi)，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達(dá)到滅菌的效果。要進(jìn)行空載熱分布和滿載熱穿透力驗(yàn)證(滿載時(shí)不超過總體積的2／3)。二種驗(yàn)證各重復(fù)三次，共做六次見表。5個(gè)點(diǎn)六次試驗(yàn)表明溫度均在121 oC，化學(xué)指示卡變黑；程度與對(duì)照色一致；培養(yǎng)基均未改變顏色，說明高壓蒸汽滅菌效果合格。
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