　　PCR儀是一種利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內(nèi)InVitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復(fù)制。因而，在PCR儀使用時對于環(huán)境要求很高，為了避免實驗未完成前可能出現(xiàn)的任何污染反應(yīng)液的情況，應(yīng)該了解關(guān)于反應(yīng)液受到污染時，反應(yīng)液處理方法：

　　l 紫外照射法：未加模板和Taq聚合酶的PCR混合液進行紫外照射，注意事項與方法同上述UV照射法；

　　l 內(nèi)切酶法：選擇識別4個堿基的內(nèi)切酶（如Msp I和Taq I等），可同時選擇幾種，以克服用一種酶只能識別特定序列的缺陷，室溫作用1h 后加熱滅活進行PCR；

　　l DNase I法：PCR混合液（未加模板和Taq聚合酶）加入0.5U DNase I，室溫反應(yīng)30 min后加熱滅活，然后加入模板和Taq聚合酶進行正常PCR擴增。該方法的優(yōu)點是不需要知道污染DNA的序列；

　　l g射線輻射法：1.5kGy的輻射可*破壞0.1ng基因組DNA，2.0 kGy可破壞104拷貝的質(zhì)粒分子，4.0 kGy仍不影響PCR，但高于此限度會使PCR擴增效率下降。引物可受照射而不影響PCR，g射線是通過水的離子化產(chǎn)生自由基來破壞DNA的。

　　PCR儀的使用要求很高，因此不允許在實驗過程中出現(xiàn)一絲錯誤，尤其是任何與實驗有關(guān)的物品的污染情況。上述關(guān)于PCR儀反應(yīng)液污染情況的及時處理方法一定能幫助您在實驗中出現(xiàn)類似情況時及時處理。

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