第三代免疫分析技術(shù),多因子檢測金標準,電化學發(fā)光原理,可應用于細胞因子、信號通路磷酸化蛋白、疾病biomarker檢測,可應用于藥物篩選、PK研究、免疫原性檢測、毒理評估、抗體藥親和力篩選等。

蛋白分析實驗技術(shù)

1、MSD超敏電化學發(fā)光平臺

針對550位北美和歐洲的高級生物醫(yī)藥研究人員的報告中顯示,基于電化學發(fā)光技術(shù)的MSD(MesoScale Discovery)是受歡迎的5大免疫分析品牌之一?？蓪estern Blot從16小時縮短至4.5小時。

基本原理:

電化學發(fā)光是一種在電極表面由電化學引發(fā)的特異性化學發(fā)光反應,是電化學和化學發(fā)光兩個過程的結(jié)合。MSD電化學發(fā)光檢測技術(shù)使用SULFO-TAGTM標記物,在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的電極表面通電后,電化學作用激發(fā)SULFO-TAGTM標記物發(fā)出強光。

MSD(Meso Scale Discovery)優(yōu)勢:

1)更高靈敏度與更寬的線性范圍

MSD靈敏度可達0.05pg/ml,有效線性范圍達6log(從亞皮克級到幾萬皮克),能同時兼顧高低豐度蛋白的檢測。傳統(tǒng) ELISA常規(guī)線性范圍在10pg/ml-1000pg/ml,采用Ultra-sensitivity試劑盒則為0.5-10pg/ml。(對比詳情見下圖)

2)樣本兼容度高,基質(zhì)效應小

MSD平臺由于其*的電化學發(fā)光原理,可將許多非特異信號予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小(如粘稠樣本,懸濁顆粒樣 本等),因此對于各類生物學樣本的兼容度高。目前測定樣本包括但不限于:血清,血漿,培養(yǎng)上清,細胞/組織裂解液,腦脊 液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物學樣本。

3)節(jié)省樣本用量,可實現(xiàn)多重檢測

傳統(tǒng)ELISA每孔所需樣本量一般為50-100uloMSD通過點陣技術(shù),在96孔石墨電極板里,可實現(xiàn)每孔25卩L樣本,10個指標的 檢測,為珍貴樣本的研究提供了更多的數(shù)據(jù)。

4)實驗流程簡便、快速、多元化

MSD提供了更為便捷快速的實驗流程,通常只需4-5小時,即可完成整個檢測流程,簡要步驟如下:

4.1V-PLEX

4.2 U-PLEX

5)信號穩(wěn)定且不受顯色順序影響

MSD由于基于電化學發(fā)光原理,信號分子SULFO-TAG需在電激發(fā)的情況下才能產(chǎn)生信號,因此整個實驗流程無需避光,每 孔激發(fā)與信號采集時長統(tǒng)一,避免了像ELISA底物與終止液加入順序先后所導致的數(shù)據(jù)差異,不受操作人員技術(shù)水平差異 的影響。請見下圖電化學發(fā)光平臺示意圖(見后頁)

應用范圍

結(jié)果展示

MSD開發(fā)試驗

項目

條件摸索

完成標準曲線摸索和樣本初步檢測

完成方法學檢測

包含內(nèi)容

A、捕獲抗體、檢測抗體、標準品、二抗條件摸索

B、標準曲線摸索和初步樣本測試

C、方法學驗證(整體重復3次)