Mouse Galectin-3 ELISA Kit
一、產(chǎn)品概述
二、試劑盒組成
預(yù)包被板:常見為 96 孔或 48 孔板,其表面已牢固固定捕獲抗體,是結(jié)合樣本中 Galectin-3 的關(guān)鍵載體。
標(biāo)準(zhǔn)品:一系列已知精確濃度的 Galectin-3 蛋白溶液,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,為樣本定量提供參照。
檢測抗體:經(jīng)生wu素標(biāo)記,能高度特異性地識別并結(jié)合 Galectin-3,在夾心結(jié)構(gòu)的形成中起重要作用。
酶結(jié)合物:如辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素,用于催化底物顯色,放大檢測信號。
底物溶液:以 TMB 溶液居多,在酶作用下從無色轉(zhuǎn)變?yōu)樗{(lán)色,通過顏色變化指示反應(yīng)進(jìn)程和結(jié)果。
終止液:一般為硫酸溶液,加入后可終止顯色反應(yīng),使顏色穩(wěn)定,便于酶標(biāo)儀準(zhǔn)確讀數(shù)。
洗滌緩沖液:用于多次洗滌酶標(biāo)板,去除未結(jié)合的各種物質(zhì),降低非特異性信號干擾,保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
稀釋液:用于將樣本、標(biāo)準(zhǔn)品以及檢測抗體等稀釋至合適的工作濃度,確保實(shí)驗體系的有效性。
三、樣本類型
血清:采集小鼠血液后,經(jīng)自然凝固和離心處理得到的上清液。血清樣本獲取相對簡便,且能反映機(jī)體整體的 Galectin-3 水平,是常用樣本之一。
血漿:使用 EDTA、肝素或檸檬酸鹽等抗凝劑采集血液,隨后離心獲得的上清液。需注意不同抗凝劑可能對檢測結(jié)果產(chǎn)生一定影響,應(yīng)嚴(yán)格依照試劑盒要求選擇。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:培養(yǎng)小鼠細(xì)胞后收集的培養(yǎng)液,可用于檢測細(xì)胞分泌到培養(yǎng)基中的 Galectin-3,有助于研究細(xì)胞層面的 Galectin-3 表達(dá)和釋放機(jī)制。
組織勻漿:將小鼠組織經(jīng)研磨破碎處理,制成勻漿后離心取上清。通過檢測組織勻漿中的 Galectin-3 含量,能了解該蛋白在特定組織中的分布和表達(dá)情況。
四、性能指標(biāo)
靈敏度:指試劑盒能夠可靠檢測到的zui低 Galectin-3 濃度。不同品牌產(chǎn)品靈敏度有差異,如 Abcam 的 Mouse Galectin-3 試劑盒(ab203369)靈敏度可達(dá) 2.4 pg/ml,Invitrogen 的試劑盒靈敏度為 6 pg/ml ,Novus Biologicals 的 Mouse Galectin-3 試劑盒 (Chemiluminescence)(貨號 NBP2 - 67972)靈敏度為 7.50 pg/ml。
檢測范圍:即試劑盒能夠準(zhǔn)確測量 Galectin-3 濃度的區(qū)間。例如,Abcam 的試劑盒檢測范圍為 7.81 pg/ml - 500 pg/ml,Invitrogen 的為 8.19 - 2000 pg/ml,Novus Biologicals 的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍是 12.50 - 800 pg/ml。
精密度:包括板內(nèi)精密度和板間精密度,常用變異系數(shù)(CV%)衡量。以 Abcam 試劑盒為例,板內(nèi) CV% 為 3.7%,板間 CV% 為 8.9% 。Novus Biologicals 的板內(nèi)變異系數(shù) CV% < 9.26%,板間變異系數(shù) CV% < 10.14%,Sigma - Aldrich 的板內(nèi)變異系數(shù) CV < 10%,板間變異系數(shù) CV < 12%。精密度越高,說明實(shí)驗結(jié)果的重復(fù)性和可靠性越好。
特異性:優(yōu)質(zhì)試劑盒應(yīng)只對小鼠 Galectin-3 產(chǎn)生特異性反應(yīng),與其他類似蛋白或物質(zhì)不發(fā)生交叉反應(yīng),從而保證檢測結(jié)果真實(shí)反映樣本中 Galectin-3 的含量。