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技術(shù)文章
分享凝膠成像儀的使用技巧！
點(diǎn)擊次數(shù)：4927 發(fā)布時(shí)間：2021-12-18
凝膠成像儀是一款用于電泳結(jié)束后對凝膠譜帶的觀察、拍攝和分析的儀器。主要用于蛋白質(zhì)、核酸凝膠成像及分析，系統(tǒng)提供白光和紫外光以及藍(lán)光光源進(jìn)行拍攝凝膠，由系統(tǒng)自帶的圖像捕捉軟件捕捉拍攝圖像，然后由系統(tǒng)自帶的圖像分析軟件對拍攝的圖像進(jìn)行分析。
使用凝膠成像儀時(shí)，需要按正確的步驟來操作，避免因不恰當(dāng)操作而造成的儀器損壞。操作步驟如下：
在初次使用，都是按正常的流程打開凝膠成像儀電源開關(guān)，打開電腦，并進(jìn)入成像軟件。根據(jù)自己的實(shí)際需求，選擇雙擊桌面的圖表軟件，按流程操作。
1、ECL拍攝
將拍攝模式切換為“ECL模式”，將濾光輪轉(zhuǎn)到ECL位。選擇合適拍攝分辨率(有像素合并功能的機(jī)器都有這個(gè)功能)，點(diǎn)擊“啟動(dòng)”。將樣品放置在樣品臺正中間，調(diào)整鏡頭的焦距使樣品占據(jù)窗口約80%左右，然后點(diǎn)擊“自動(dòng)曝光”，勾掉“負(fù)片”并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰.(光圈越大，自動(dòng)曝光所需時(shí)間越短。)并先用單幀拍攝，拍攝一張Mark照片。關(guān)閉反射白光后給放置在化學(xué)發(fā)光成像板上的纖維素膜均勻加上發(fā)光液。將拍攝方式設(shè)置為“規(guī)則積分”，勾上“負(fù)片”，并設(shè)置的時(shí)間和張數(shù)，點(diǎn)擊“拍攝”按鈕即可。
2、普通凝膠拍攝
(1)將拍攝模式切換為“普通模式”，凝膠成像儀，將濾光輪轉(zhuǎn)到UV位(無綠光鏡輪的無需調(diào)整)。
(2)選擇合適拍攝分辨率(機(jī)器有像素合并功能)，點(diǎn)擊“啟動(dòng)”。
(3)DNA膠拍攝：將DNA膠放置在紫外臺正中間，調(diào)整焦距使樣品占據(jù)窗口約80%左右，然后點(diǎn)擊“自動(dòng)曝光”，并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰.然后關(guān)閉反射白光，開啟透射紫外，并微調(diào)，確保在紫外下處于清晰狀態(tài)。
(4)蛋白質(zhì)膠拍攝：將蛋白質(zhì)膠放在拆疊白光板的中間，關(guān)閉反射白光，開啟透射白光，然后點(diǎn)擊“自動(dòng)曝光”，并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰。
(5)在軟件界面點(diǎn)擊“拍攝”按鈕即可。