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小鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒

時間:2015/3/30閱讀:829
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小鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒實驗-結(jié)果判定:定量測定   

ELISA操作步驟復雜,影響反應因素較多,特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標準曲線的范圍一般較寬,曲線zui高點的吸光度可接近2.0,繪制時常用半對數(shù)紙,以檢測物的濃度為橫坐標,以吸光度為縱坐標,將各濃度的值逐點連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。甲胎蛋白質(zhì)ELISA測定的標準曲線示。測定小分子量物質(zhì)常用競爭法,其標準曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負相關。標準曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測定的標準曲線示。

小鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒實驗之顯色   

顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應溫度和時間應按規(guī)定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當縮短或延長反應時間,及時判斷。   

OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應20-30分鐘后即不再加深,再延長反應時間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應應避光進行,顯色反應結(jié)束時加入終止液終止反應。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。   

TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應觀察結(jié)果。但為保證實驗結(jié)果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當時間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達,隨即逐漸減弱,至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉(zhuǎn)變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。 

小鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒實驗之比色   

比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗,需先將板置于標準96孔的座架中,才可進行比色。在加底物液顯色前,先將軟板邊緣剪凈,這樣,此板就可*平妥坐入座架中。比色時應先以蒸餾水校零點,測讀底物孔(未經(jīng)任何反應僅加底物液的孔)和空白孔(以生理鹽水或稀釋液代替標本作全過程的孔),以記錄本次試驗的試劑狀況。其后可用空白孔以蒸餾水校零點,以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度,然后進行計算。   

比色結(jié)果的表達以往通用光密度(oplical density,OD),現(xiàn)按規(guī)定用吸光度(absorbence,A),兩者含義相同。通常的表示方法是,將吸收波長寫于A字母的右下角,如OPD的吸收波長為492nm,表示方法為"A492nm"或"OD492nm"。

小鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA試劑盒相關產(chǎn)品如下:xyF754Hu 人過氧化還原酶4(PRDX4)檢測試劑盒
xyF756Hu 人過氧化還原酶6(PRDX6)檢測試劑盒
xyF819Hu 人張力蛋白3(TNS3)檢測試劑盒
xyF863Hu 人胞裂蛋白3(SEPT3)檢測試劑盒
xyF952Hu 人Nesprin 2蛋白(Nesp2)檢測試劑盒
xyF953Hu 人Nesprin 1蛋白(Nesp1)檢測試劑盒
xyF994Hu 人網(wǎng)狀蛋白4(RTN4)檢測試劑盒
xyG011Hu 人甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)檢測試劑盒
xyG191Hu 人N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)檢測試劑盒
xyG239Hu 人外生骨疣蛋白1(EXT1)檢測試劑盒
xyG300Hu 人小腦肽1(CBLN1)檢測試劑盒
xyG342Hu 人色胺酸羥化酶1(TPH1)檢測試劑盒
xyG343Hu 人色胺酸羥化酶2(TPH2)檢測試劑盒
xyG356Hu 人3-羥基丁酸脫氫酶1(BDH1)檢測試劑盒
xyG439Hu 人小白蛋白(PVALB)檢測試劑盒
xyG465Hu 人腺苷高半胱氨酸水解酶(AHCY)檢測試劑盒
xyG476Hu 人組氨酸脫羧酶(HDC)檢測試劑盒
xyG529Hu 人溶血卵磷脂?;D(zhuǎn)移酶1(LPCAT1)檢測試劑盒
xyG530Hu 人溶血卵磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶2(LPCAT2)檢測試劑盒
xyG531Hu 人溶血卵磷脂?;D(zhuǎn)移酶3(LPCAT3)檢測試劑盒
xyG610Hu 人芳基硫酸酯酶B(ARSB)檢測試劑盒
xyG820Hu 人甘胺酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GNMT)檢測試劑盒
xyG919Hu 人尿苷二磷酸糖基轉(zhuǎn)移酶8(UGT8)檢測試劑盒
xyG948Hu 人泛醌蛋白2(UBQLN2)檢測試劑盒
xyG963Hu 人胸苷酸合成酶(TYMS)檢測試劑盒
xyH015Hu 人踝蛋白2(TLN2)檢測試劑盒
xyH033Hu 人轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶6(TGM6)檢測試劑盒
xyH088Hu 人突觸極蛋白2(SYNPO2)檢測試劑盒
xyH097Hu 人亞硫酸鹽氧化酶(SUOX)檢測試劑盒
xyH108Hu 人硫酸酯酶1(SULF1)檢測試劑盒
xyH135Hu 人角鯊烯單加氧酶(SQLE)檢測試劑盒

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