小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA試劑盒測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因分析

ELISA即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，是一種常用的固相酶免疫測(cè)定方法。Engvall 和Perlmann于1971年zui先應(yīng)用該法進(jìn)行了IgG定量測(cè)定，并命名為"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是：

①使抗原（或抗體）結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性；

②使抗原（或抗體）與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標(biāo)抗原（或抗體），而且此酶標(biāo)抗原（或抗體）既保留其免疫活性，又保留其酶活性；

③測(cè)定時(shí)將受檢標(biāo)本（抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原（或抗體）按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進(jìn)行反應(yīng)，再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的抗體或抗原量成一定比例；再加入酶反應(yīng)底物后，底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物，根據(jù)其顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析，以了解被測(cè)標(biāo)本中抗體或抗原含量。

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA試劑盒添加回收的幾種誤區(qū)：

    呋喃類代謝物提取過程通常分三個(gè)關(guān)鍵步驟：

 水解-----衍生化-----提取

 (1)采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的zui大標(biāo)準(zhǔn)濃度進(jìn)行添加回收。如德國拜發(fā)和我公司AOZ試劑盒中的第6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)4.05ppb，AMOZ試劑盒中的第6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)8.1ppb。因?yàn)檫@些標(biāo)準(zhǔn)品是已經(jīng)過衍生化后的標(biāo)準(zhǔn)品，不能代表樣本前處理實(shí)驗(yàn)中的加酸水解和加衍生化試劑衍生這兩個(gè)步驟，所以就算回收率很高，但失去了實(shí)際參考價(jià)值。

 （2）*依賴未衍生的代謝物標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行添加回收。因部分未衍生的代謝物在配制成標(biāo)準(zhǔn)品后有一定的有效期，會(huì)存在潛在的不穩(wěn)定因素，而且添加回收僅能考證衍生化和提取兩個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，不能驗(yàn)證從組織蛋白中水解呋喃類代謝物的過程，因此也有一定的局限性。

 的評(píng)價(jià)方案：采用經(jīng)LC-MS-MS確證的陰陽性樣品，留作質(zhì)控樣品，對(duì)檢測(cè)的樣本和試劑盒進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。這也是實(shí)驗(yàn)室所出數(shù)據(jù)可信度說服力的關(guān)鍵點(diǎn)。

加樣

 在小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。

  加標(biāo)本一般用微量加樣器，按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以免發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA試劑盒其他產(chǎn)品展示：xyF025Hu 人真核翻譯延伸因子1γ(EEF1γ)檢測(cè)試劑盒
xyC109Hu 人生長分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒
xyC071Hu 人干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒
xyQ870Hu 人含BED型鋅指蛋白3(ZBED3)檢測(cè)試劑盒
xyD387Hu 人白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制因子(LEI)檢測(cè)試劑盒
xyL060Hu 人帕金森氏病蛋白2(PARK2)檢測(cè)試劑盒
xyC358Hu 人鈣蛋白酶2(CAPN2)檢測(cè)試劑盒
xyC457Hu 人內(nèi)切核酸酶G(ENDOG)檢測(cè)試劑盒
xyD065Hu 人Apelin 17蛋白(AP17)檢測(cè)試劑盒
xyF258Hu 人小亞基鈣蛋白酶1(CAPNS1)檢測(cè)試劑盒
xyH136Hu 人絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶長鏈堿性亞基3(SPTLC3)檢測(cè)試劑盒
xyH645Hu 人眼小畸形關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)檢測(cè)試劑盒
xyL074Hu 人泛素蛋白連接酶E3成分N-識(shí)別蛋白4(UBR4)檢測(cè)試劑盒
xyP783Hu 人非ATP酶蛋白酶體26S亞基10(PSMD10)檢測(cè)試劑盒
xyE123Hu 人肝配蛋白A受體3(EPHA3)檢測(cè)試劑盒
xyE233Hu 人含桿狀病毒IAP重復(fù)蛋白6(BIRC6)檢測(cè)試劑盒
xyF950Hu 人非紅細(xì)胞血影蛋白β4(SPTβN4)檢測(cè)試劑盒
xyC516Hu 人生長激素促分泌素受體(GHSR)檢測(cè)試劑盒
xyG697Hu 人G蛋白偶聯(lián)受體120(GPR120)檢測(cè)試劑盒
xyC971Hu 人游離脂肪酸受體1(FFAR1)檢測(cè)試劑盒
xyK403Hu 人Fas凋亡抑制分子3(FAIM3)檢測(cè)試劑盒
xyH689Hu 人甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1)檢測(cè)試劑盒
xyG601Hu 人有機(jī)溶質(zhì)載體伴侶1(OSCP1)檢測(cè)試劑盒
xyH337Mu 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)檢測(cè)試劑盒
xyK305Hu 人RAS癌基因家族成員RAB(RAB)檢測(cè)試劑盒
xyP899Hu 人角蛋白33A(KRT33A)檢測(cè)試劑盒
xyR654Hu 人角蛋白40(KRT40)檢測(cè)試劑盒
xyD370Hu 人Kruppel樣因子15(KLF15)檢測(cè)試劑盒
xyA001Hu 人激活素A(ACVA)檢測(cè)試劑盒
xyA002Hu 人白細(xì)胞激活黏附因子(ALCAM)檢測(cè)試劑盒
xyA004Hu 人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)檢測(cè)試劑盒
xyA005Hu 人血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)檢測(cè)試劑盒