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目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化磷酸化系列>> Na+k+ ——ATP酶生化檢測試劑盒

Na+k+ ——ATP酶生化檢測試劑盒
  • Na+k+  ——ATP酶生化檢測試劑盒
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  • Na+k+  ——ATP酶生化檢測試劑盒
參考價300-5000/盒
具體成交價以合同協(xié)議為準

參考價:¥300 ~ ¥5000

具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 其他品牌 品牌
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  • 經(jīng)銷商 廠商性質
  • 上海市 所在地

更新時間:2024-11-22 20:14:48瀏覽次數(shù):904評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/48樣 50管/24樣
貨號 EY-01S1129 應用領域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅用于科研
Na+k+ ——ATP酶生化檢測試劑盒Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。

商品屬性:

產(chǎn)品名稱:Na+k+  ——ATP酶生化檢測試劑盒

規(guī)格:100/48 50/24 

貨號 : EY-01S1129

測試方法:微量法 可見分光光度法  

分類:氧化磷酸化系列

商品詳情:

測定意義:Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。測定原理:Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性。需自備的儀器和用品:可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提?。?/p>

1、組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2、細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測。

3、血清等液體:直接測定。


5.png



ADH測定操作:

1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。

3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽測定管=A1-A2。

測定步驟:

1、分光光度計預熱30min以上,調節(jié)波長至340nm,蒸餾水調零。

2、將試劑二在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。

3、操作表:

試劑名稱μL

測定孔

樣本

20

試劑二

760

試劑三

10

試劑四

10


將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應1min后的吸光度A2,計算ΔA=A1-A2。

注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,使A1-A2小于0.5,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。

NAD-MDH活力單位的計算:

1、血清(漿)NAD-MDH活力的計算

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

2、組織、細菌或細胞中NAD-MDH活力的計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

V反總:反應體系總體積,8×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,1 min;W:樣本質量,g;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;2000:細胞或細菌總數(shù),2000萬。

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