小鼠雜交瘤細(xì)胞；IIB13圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱(chēng) 小鼠雜交瘤細(xì)胞；IIB13圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性  可產(chǎn)生單克隆抗體。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C20
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類(lèi)

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

α-銀環(huán)蛇毒試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48Tα-銀環(huán)蛇毒試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：α-銀環(huán)蛇毒試劑盒、α-銀環(huán)蛇毒elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
豬促胃液受體試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T豬促胃液受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬促胃液受體試劑盒、豬促胃液受體elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
大鼠金屬硫試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T大鼠金屬硫試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠金屬硫試劑盒、大鼠金屬硫elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒、兔增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
山羊磷化腺苷活化激酶試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T山羊磷化腺苷活化激酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：山羊磷化腺苷活化激酶試劑盒、山羊磷化腺苷活化激酶elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔子神經(jīng)特異性醇化酶試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T兔子神經(jīng)特異性醇化酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子神經(jīng)特異性醇化酶試劑盒、兔子神經(jīng)特異性醇化酶elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔子凝血酶受體試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T兔子凝血酶受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子凝血酶受體試劑盒、兔子凝血酶受體elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。
兔熱休克70試劑盒規(guī)格型號(hào)：96T/48T兔熱休克70試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克70試劑盒、兔熱休克70elisa試劑盒保存條件：2-8℃保質(zhì)期：6個(gè)月。100mL    DNA  Tris HCl，1M，pH7.5    
50mL    動(dòng)物細(xì)胞裂解液 A    
10 次    克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成試劑盒    
Poly(U) 聚合酶    130620-60    60U
PCR 法 DNA 探針生物素標(biāo)記試劑盒     90604B-5    5次
25000U    T7 RNA 聚合酶    
50mg    刀豆球蛋白 A Ⅲ    
500mg    RNase A 干粉    
100μL    小鼠抗 CBP 標(biāo)簽單抗    
二硫鍵異構(gòu)酶，人    130868-1    1mg
Taq 酶抗體    130815-250    250U
10mL    土鹽溶液 ,100mg/mL    
500mL    F12K 液體培養(yǎng)基 ( 無(wú)血清和雙抗 )    
5g    N,N- 雙 (2- 羥乙基 )-3- 氨基乙磺酸    
5mL    MgSO4溶液，10mM，PCR     
氨甲喋呤    CAS59-05-2    10mg
真細(xì)菌種屬鑒定 PCR Mix 2    131131B-100    100 次
250 次    細(xì)菌 RNAout    
1g    庚烷磺酸    
1g    1,4- 雙 (5- 苯基 -2- 噁唑基 ) 苯    
50 次    柱式病毒 RNA-DNA 雙提試劑盒    
DEAE 葡聚糖凝膠 A-50    CAS39455-31-7    25g
K802 菌種    12-242    1mL
200mL    鹽酸胍溶液，8M