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白蛋白微量法測(cè)試盒

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-03-21 14:29:18瀏覽次數(shù):313次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號(hào) GOY-01S6963 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅用于科研
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商品介紹:
白蛋白由肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞合成,在血漿蛋白中含量最多,具有重要的生理功能,包括維持膠體滲透壓,并可與長(zhǎng)鏈脂肪酸、膽汁酸、膽紅素、血紅素、鈣和鎂離子等物質(zhì)結(jié)合。它擁有抗氧化性和抗凝血性,能充當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和藥物的運(yùn)輸載體,同時(shí)也是血漿PH值的緩沖劑。血清白蛋白含量直接關(guān)系到肝臟疾病、腎臟疾病、營(yíng)養(yǎng)不良或蛋白流失性腸道病癥的發(fā)生發(fā)展,是臨床檢測(cè)的一個(gè)重要指標(biāo)。

測(cè)定原理

白蛋白在pH4.2的緩沖液中帶正電荷,可與帶負(fù)電荷的染料溴甲酚綠結(jié)合形成藍(lán)綠色復(fù)合物,在波長(zhǎng)630nm處有吸收峰,在一定范圍內(nèi)其顏色深淺與白蛋白濃度成正比例。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

產(chǎn)品名稱:白蛋白微量法測(cè)試盒
規(guī)格100/96
測(cè)試方法微量法
貨號(hào):GOY-01S6963
分類:蛋白含量測(cè)定系列

試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存;
測(cè)定步驟
1
分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2
、 將試劑一、二、三37(哺乳動(dòng)物)25(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3
、 加樣表:

圖1.jpg

樣本的前處理
FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP
nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;εNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
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