產(chǎn)品名稱：肉桂醇脫氫酶（CAD)測(cè)試盒說明書

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6655

測(cè)定意義

CAD是木質(zhì)素生物合成途徑中的關(guān)鍵酶之一，是木質(zhì)素單體合成反應(yīng)中的最后一步，催化多種不同的肉桂醛（香豆醛、芥子醛以及松柏醛等）生成與之相應(yīng)的肉桂醇。該酶多存在于高等植物、酵母、菌類中，研究該酶可以探討多種生物細(xì)胞發(fā)育過程中木質(zhì)素沉積的代謝機(jī)理，為減少水果石細(xì)胞含量提高其品質(zhì)提供依據(jù)。

測(cè)定原理：

CAD催化肉桂醇和NADP生成肉桂醛和NADPH，在340nm下測(cè)定NADPH生成速率，即可反映CAD活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

Anti-TIMP-4/FITC 熒光素標(biāo)記金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible 一氧化氮合成酶-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

三碘甲狀腺素T3抗體 Anti-T3 0.2ml

SSX8 英文名稱： 滑膜肉瘤X斷點(diǎn)蛋白8抗體 0.1ml

Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) 英文名稱： 磷酸化雌受體α抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-LRP5(Thr1492) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格 0.1ml

NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible 一氧化氮合成酶-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CD63/MLA1 溶酶體膜糖蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Bag1/RAP46 抑凋亡基因bag1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-A Raf(Ser299) 磷酸化A-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml

Ki67 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

UBE2J2 英文名稱： 泛素蛋白連接酶J2抗體 0.2ml

CHST12 英文名稱： 碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶12抗體 0.1ml

Anti-Bag1/RAP46 抑凋亡基因bag1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

semaphorin 3F 英文名稱： 臂板蛋白3F抗體 0.1ml

EED 英文名稱： 胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體 0.2ml

干細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 Anti-SCF 0.2ml

Anti-Tau protein/FITC 熒光素標(biāo)記微管相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MEF2D(Ser444) 磷酸化肌細(xì)胞特異性增強(qiáng)因子2D抗體 規(guī)格 0.1ml

IRS-2 胰島素受體底物-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
肉桂醇脫氫酶（CAD)測(cè)試盒說明書硬脂酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))坎地沙坦酯蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

甜蜜素(標(biāo)準(zhǔn)品)鹽酸司他斯汀逆轉(zhuǎn)錄酶（REVERSE TRANSCREPTASE）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

L-山梨糖(標(biāo)準(zhǔn)品)鹽酸二甲弗林組織逆轉(zhuǎn)錄酶（REVERSE TRANSCREPTASE）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

糖精鈉 水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)鹽酸坦洛新血液逆轉(zhuǎn)錄酶（REVERSE TRANSCREPTASE）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000µg/mL,基體:5%HCI)普伐他汀鈉血液逆轉(zhuǎn)錄酶（REVERSE TRANSCREPTASE）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

鎘標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,介質(zhì):1.0mol/L 硝酸)托芬那酸基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

銫標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:水)鹽酸阿比朵爾組織基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

鈰標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)甲鈷體液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒