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如何選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)板?

閱讀:854      發(fā)布時(shí)間:2023-10-11
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細(xì)胞培養(yǎng)是一種基本的生命科學(xué)研究技術(shù),已成為現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)研究的重要手段。細(xì)胞培養(yǎng)板是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常用和重要的實(shí)驗(yàn)室耗材,選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)板對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性有至關(guān)重要的影響。

 

細(xì)胞培養(yǎng)板根據(jù)底部形狀的不同可分為平底、圓底(U型)和V底(V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等;表面處理方式有TC處理和超低吸附處理;顏色有透明色、白色、黑色等。那么如何從這么多的規(guī)格中選擇適合實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)板呢?跟小愛去瞅瞅怎么選擇吧。


 

一、孔數(shù)的選擇

 

細(xì)胞培養(yǎng)板的孔數(shù)包含6孔、12孔、24孔、48孔、96孔和384孔。不同孔數(shù)的培養(yǎng)板能培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量不同(見表1),最終的應(yīng)用場(chǎng)景也會(huì)不同。如何選擇孔數(shù)主要根據(jù)實(shí)驗(yàn)所需的通量水平以及具體的實(shí)驗(yàn)要求來決定。例如WB、流式檢測(cè)相關(guān)實(shí)驗(yàn),需要較多的細(xì)胞樣本量,最終的檢測(cè)通量較低,一般會(huì)選擇6孔板、24孔板;又如CTG實(shí)驗(yàn)、CCK8實(shí)驗(yàn)、MTT實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)通量較高,最終的檢測(cè)手段可以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,多數(shù)可以選擇96孔板或者384孔板。

 

表1 不同類型細(xì)胞培養(yǎng)板通用信息


培養(yǎng)板類型

面積(cm2

培養(yǎng)液量(mL)

細(xì)胞量

6孔細(xì)胞培養(yǎng)板

9.6

2.5

2.5×106

12細(xì)胞孔培養(yǎng)板

4.5

2.0

106

24細(xì)胞孔培養(yǎng)板

2

1.0

5×105

96細(xì)胞孔培養(yǎng)板

0.32

0.1

105





二、底部形狀的選擇

 

細(xì)胞培養(yǎng)板根據(jù)底部形狀的不同主要分為平底、圓底(U型)和V底(V型)三大種。平底可用于任何類型細(xì)胞培養(yǎng)是我們?nèi)粘<?xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中使用最多的。一般針對(duì)特殊實(shí)驗(yàn)需求會(huì)用到圓底(U型)和V底(V型)培養(yǎng)板,日常實(shí)驗(yàn)中用的較少。圓底(U型)多用于培養(yǎng)懸浮細(xì)胞,例如免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)需要兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí),需要二者相互接觸以刺激,圓底(U型)板可利用重力將細(xì)胞聚集在小范圍內(nèi)。V底(V型)板中細(xì)胞緊密接觸,一般用于細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn),可使有效靶細(xì)胞緊密接觸[也可用圓底(U型)板替代,加入細(xì)胞后,低速離心即可]。

 

三、表面處理方式的選擇

 

細(xì)胞培養(yǎng)板的處理方式主要有TC處理和超低吸附處理。選擇哪種表面處理方式,主要取決于培養(yǎng)的細(xì)胞是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞。細(xì)胞培養(yǎng)板一般采用的原材料是聚苯乙烯,這一材料具有疏水性。對(duì)于貼壁細(xì)胞而言,需要貼附在親水表面?zhèn)饶苌L(zhǎng)。經(jīng)過TC處理的細(xì)胞培養(yǎng)板,表面改性后更適合貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。超低吸附處理是將特殊的兩性分子聚合物鍍膜至培養(yǎng)板表層,可有效抑制細(xì)胞附著,從而滿足懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的需求。因此對(duì)于貼壁細(xì)胞可選擇TC處理細(xì)胞培養(yǎng)板,對(duì)于懸浮細(xì)胞可選擇超低吸附處理細(xì)胞培養(yǎng)板或者未經(jīng)任何處理的細(xì)胞培養(yǎng)板。

 

四、細(xì)胞培養(yǎng)板顏色的選擇

 

細(xì)胞培養(yǎng)板的顏色與應(yīng)用息息相關(guān)。細(xì)胞培養(yǎng)板的顏色主要有透明、白色、黑色。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細(xì)胞,可選擇透明的細(xì)胞培養(yǎng)板。對(duì)于可見光光譜以外的應(yīng)用(如冷光或熒光),就必須使用有顏色的細(xì)胞培養(yǎng)板(如白色或黑色)的。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時(shí),底部應(yīng)該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時(shí),應(yīng)選擇底部透明的培養(yǎng)板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便最大限度提高信號(hào)的反射率,而大于300nm的熒光應(yīng)用時(shí)通常使用黑色表面,以吸收激發(fā)信號(hào)。同時(shí)有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號(hào)串?dāng)_。具體應(yīng)用所采用的不同顏色培養(yǎng)板總結(jié)如下:

 

1)發(fā)光檢測(cè)(冷光)—白色細(xì)胞培養(yǎng)板,以便最大限度提高信號(hào)的反射率;
2)熒光檢測(cè)(熒光)—黑色細(xì)胞培養(yǎng)板,以吸收激發(fā)信號(hào),可以防止相鄰孔之間的信號(hào)串?dāng)_;
3)頂部讀數(shù)—底部不透明的細(xì)胞培養(yǎng)板。

 

顯微鏡或底部讀數(shù)—底部透明的細(xì)胞培養(yǎng)板。

 

五、細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的使用辨別

 

酶標(biāo)板作為固相載體對(duì)抗原、抗體或抗原抗體復(fù)合物的吸附起著重要作用,可廣泛應(yīng)用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析(A260/A280)和蛋白定量(A280/BCA/Braford/Lowry),酶活、酶動(dòng)力學(xué)檢測(cè),酶聯(lián)免疫測(cè)定(ELISAs),細(xì)胞增殖與毒性分析,細(xì)胞凋亡檢測(cè)(MTT),報(bào)告基因檢測(cè)及G蛋白偶聯(lián)受體分析(GPCR)等實(shí)驗(yàn)。相比于細(xì)胞培養(yǎng)板,酶標(biāo)板需要盡量降低實(shí)驗(yàn)誤差,制作要求高,價(jià)格也相對(duì)較高。96孔細(xì)胞培養(yǎng)板和酶標(biāo)板有一定的功能交叉,它們使用上有哪些區(qū)分呢?

 

1、細(xì)胞培養(yǎng)板可以當(dāng)酶標(biāo)板使用嗎?

當(dāng)測(cè)試可見光波長(zhǎng)的吸收值時(shí),大多數(shù)96孔板透明板都可以用。但是當(dāng)測(cè)試高精度和特殊波長(zhǎng),為避免孔板產(chǎn)生的吸收造成的影響就要用特殊的酶標(biāo)板。

 

2、酶標(biāo)板可以當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)板使用嗎?

酶標(biāo)板沒有進(jìn)行貼壁處理,是不可以用來培養(yǎng)貼壁細(xì)胞的。

 

3、測(cè)吸光度可以用細(xì)胞培養(yǎng)板嗎?

細(xì)胞培養(yǎng)板可以進(jìn)行吸光度的檢測(cè),經(jīng)常用它來做樣品的蛋白定量等。

 

愛必信超低吸附細(xì)胞培養(yǎng)板(適合懸浮細(xì)胞培養(yǎng))


號(hào)

名稱

底型

顏色類型

包裝規(guī)格

abs7056

超低吸附培養(yǎng)板(6孔板)

平底

透明

10個(gè)/箱

abs7057

超低吸附培養(yǎng)板(12孔板)

平底

透明

10個(gè)/箱

abs7147

超低吸附培養(yǎng)板(48孔板)

平底

透明

10個(gè)/箱

abs7058

超低吸附培養(yǎng)板(24孔板)

平底

透明

10個(gè)/箱

abs7059

超低吸附培養(yǎng)板(96孔板,平底)

平底

透明

10個(gè)/箱

abs7060

超低吸附培養(yǎng)板(96孔板,圓底)

U底

透明

10個(gè)/箱

abs7148

超低吸附培養(yǎng)板(96孔板,黑底透明蓋)

平底

黑底透明蓋

10個(gè)/箱

abs7149

超低吸附培養(yǎng)板(96孔板,黑框透明底透明蓋)

平底

黑框透明底透明蓋

10個(gè)/箱

abs7150

超低吸附培養(yǎng)板(96孔板,白底透明蓋)

平底

白底透明蓋

10個(gè)/箱

abs7151

超低吸附培養(yǎng)板(96孔板,白框透明底透明蓋)

平底

白框透明底透明蓋

10個(gè)/箱

abs7152

超低吸附細(xì)胞培養(yǎng)板(384孔板,方孔,透明平底)

平底

透明

10個(gè)/箱

abs7153

超低吸附細(xì)胞培養(yǎng)板(384孔板,方孔,全黑平底)

平底

全黑

10個(gè)/箱

abs7154

超低吸附細(xì)胞培養(yǎng)板(384孔板,方孔,全白平底)

平底

全白

10個(gè)/箱

abs7155

超低吸附細(xì)胞培養(yǎng)板(384孔板,方孔,黑色透明底平底)

  平底

黑色透明底

10個(gè)/箱

abs7156

超低吸附細(xì)胞培養(yǎng)板(384孔板,方孔,白色透明底平底)

平底

白色透明底

10個(gè)/箱




 

愛必信TC處理細(xì)胞培養(yǎng)板(適合貼壁細(xì)胞培養(yǎng))


號(hào)

名稱

底型

顏色類型

包裝規(guī)格

abs7033

細(xì)胞培養(yǎng)板(標(biāo)準(zhǔn)透明6孔板)

平底

透明

50個(gè)/箱

abs7034

細(xì)胞培養(yǎng)板(標(biāo)準(zhǔn)透明12孔板)

平底

透明

50個(gè)/箱

abs7035

細(xì)胞培養(yǎng)板(標(biāo)準(zhǔn)透明24孔板)

平底

透明

50個(gè)/盒

abs7040

細(xì)胞培養(yǎng)板(標(biāo)準(zhǔn)透明48孔板)

平底

透明

50個(gè)/盒

abs7036

細(xì)胞培養(yǎng)板(標(biāo)準(zhǔn)透明96孔板)

平底

透明

50個(gè)/盒

abs7037

細(xì)胞培養(yǎng)板(標(biāo)準(zhǔn)透明96孔板,U底)

U底

透明

50個(gè)/盒

abs7242

96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(白板透明底透明蓋,TC處理)

平底

白板透明底透明蓋

48個(gè)/箱

abs7243

96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(白板透明底白蓋,TC處理)

平底

白板透明底白蓋

48個(gè)/箱

abs7244

96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(黑板透明底透明蓋,TC處理)

平底

黑板透明底透明蓋

48個(gè)/箱

abs7245

96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(黑板透明底黑蓋,TC處理)

平底

黑板透明底黑蓋

48個(gè)/箱

abs7234

384孔細(xì)胞培養(yǎng)板(白板透明蓋,TC處理)

平底

白板透明蓋

48個(gè)/箱

abs7235

384孔細(xì)胞培養(yǎng)板(白板白蓋,TC處理)

平底

白板白蓋

48個(gè)/箱

abs7236

384孔細(xì)胞培養(yǎng)板(黑板透明蓋,TC處理)

平底

黑板透明蓋

48個(gè)/箱

abs7237

384孔細(xì)胞培養(yǎng)板(黑板黑蓋,TC處理)

平底

黑板黑蓋

48個(gè)/箱

abs7238

384孔細(xì)胞培養(yǎng)板(白板透明底透明蓋,TC處理)

平底

白板透明底透明蓋

48個(gè)/箱

abs7239

384孔細(xì)胞培養(yǎng)板(白板透明底白蓋,TC處理)

平底

白板透明底白蓋

48個(gè)/箱

abs7240

384孔細(xì)胞培養(yǎng)板(黑板透明底透明蓋,TC處理)

平底

黑板透明底透明蓋

48個(gè)/箱

abs7241

384孔細(xì)胞培養(yǎng)板(黑板透明底黑蓋,TC處理)

平底

黑板透明底白蓋

48個(gè)/箱




 

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