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Jurkat(Clone E6-1)細(xì)胞培養(yǎng)攻略

閱讀:691      發(fā)布時(shí)間:2023-12-29
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Jurkat(Clone E6-1)概述:

 

Jurkat(Clone E6-1)細(xì)胞,人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞,是肯德爾·史密斯博士將Jurkat細(xì)胞在41°C孵育48h,于巨噬細(xì)胞上進(jìn)行有限稀釋克隆得到的,Jurkat(Clone E6-1)細(xì)胞是從14歲男性急性T細(xì)胞白血病患者的外周血建立的。在用佛波酯和針對T3抗原的凝集素或單克隆抗體刺激后產(chǎn)生大量的IL-2(需要兩種刺激物誘導(dǎo)IL-2的產(chǎn)生)??捎糜诿庖呦到y(tǒng)疾病研究、免疫學(xué)和免疫腫瘤學(xué)研究,該細(xì)胞株克服了Jurkat細(xì)胞系建立初期易被支原體污染的缺點(diǎn)。


圖 Jurkat細(xì)胞系譜

 

Jurkat(Clone E6-1)基本信息:

 


細(xì)胞形態(tài)

淋巴細(xì)胞樣

生長特性

單個(gè)或成團(tuán),懸浮生長

生長培養(yǎng)基

 RPMI-1640(abs9484)+10%FBS(abs972)+1%P/S(abs9244)

倍增時(shí)間

約20h

換液

每2-3天一次(具體時(shí)間取決于細(xì)胞密度)

凍存液

DMSO:FBS:DMSO=1:2:17




 

圖 Jurkat(Clone E6-1)形態(tài)圖

 

Jurkat(Clone E6-1)換液方法:

 

補(bǔ)液法:培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變黃,則補(bǔ)加適量的新鮮培養(yǎng)基(1-2mL左右),補(bǔ)充2-3次后,1200rpm (約250g)3min,全部離心,棄上清,將細(xì)胞沉淀重懸于新的培養(yǎng)基中;

 

半換液法:豎起培養(yǎng)瓶靜置一段時(shí)間(10min左右),待細(xì)胞沉入底部,小心吸出約一半的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)移到離心管離心,若有細(xì)胞沉淀,用少量培養(yǎng)基重選后再移入培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)瓶瓶補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基;

 

注意:上述過程中若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過1×106 cells/mL則考慮換液,建議細(xì)胞密度保持在1×105-1×106cells/mL, 細(xì)胞密度不可超過3×106/mL。


圖 半換液示意圖

 

培養(yǎng)要點(diǎn):

 

1、該細(xì)胞受密度影響較大,低密度時(shí)細(xì)胞生長速度較慢,接種和培養(yǎng)時(shí)注意細(xì)胞密度;
2、Clone E6-1復(fù)蘇后有時(shí)需要5-7d才能恢復(fù)到凍存前的狀態(tài),前兩天勿對其進(jìn)行操作;
3、建議凍存密度提高到2-3×106/mL,凍存率可達(dá)到70%左右;
4、若發(fā)現(xiàn)較大細(xì)胞團(tuán),可用槍頭輕微吹散,切勿用力過度,對其產(chǎn)生機(jī)械刺激。

 

Jurkat(Clone E6-1)的應(yīng)用:

 

1、Jurkat(Clone E6-1)已被廣泛用作TCR信號通路的遺傳和生化分析的有力工具;

2、Jurkat和Jurkat(Clone E6-1)都可用于成像研究,以確定超抗原特異性結(jié)合物中免疫突觸(IS)組裝的關(guān)鍵;


圖 E6.1 LFA-1high和Raji細(xì)胞(APC)的15min綴合物進(jìn)行免疫熒光分析

 

3、Jurkat細(xì)胞模型已廣泛應(yīng)用于T細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞因子和受體的表達(dá), 以及各類感染性疾病的治療和機(jī)制研究中, 如HIV、EB、丙型肝炎等病毒的感染研究,其實(shí)驗(yàn)結(jié)果可作為人周圍血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)研究和前期實(shí)驗(yàn)。

 

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*本文圖片來源于網(wǎng)絡(luò),僅供學(xué)習(xí)參考用


參考文獻(xiàn)


[1] Cassioli C, Balint S, Compeer EB, et al. Increasing LFA-1 Expression Enhances Immune Synapse Architecture and T Cell Receptor Signaling in Jurkat E6.1 Cells. Front Cell Dev Biol. 2021;9:673446. Published 2021 Jul 23. doi:10.3389/fcell.2021.673446
[2] Chen JL, Nong GM. [Advances in application of Jurkat cell model in research on infectious diseases]. Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2018 Mar;20(3):236-242. Chinese. doi: 10.7499/j.issn.1008-8830.2018.03.014. PMID: 29530126; PMCID: PMC7389782.
 

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