背景介紹:
疫情mRNA疫苗的成功開發(fā)使得mRNA技術(shù)得到重要的關(guān)注。mRNA技術(shù)作為一種通用性技術(shù),其研發(fā)路徑和生產(chǎn)工藝顯著區(qū)別于傳統(tǒng)的生物醫(yī)藥研發(fā)模式,有望在傳染病疫苗、腫瘤疫苗、免疫治療、蛋白替代療法、治療性抗體等多個(gè)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,是醫(yī)藥研發(fā)進(jìn)入新紀(jì)元。
在對于核酸藥物遞送系統(tǒng)研究、蛋白表達(dá)的療效研究以及mRNA藥物研發(fā)中工具mRNA起到非常重要作用,那么大家知道什么是工具mRNA,它的作用是什么呢?
什么是工具mRNA?
工具mRNA(mRNA標(biāo)準(zhǔn)品)即成品的標(biāo)準(zhǔn)型信使核糖核酸(類似于大家分子實(shí)驗(yàn)中常用的成品質(zhì)粒)。用戶購買后無需對mRNA標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行任何處理,可直接應(yīng)用于相應(yīng)實(shí)驗(yàn)。
愛必信擁有一系列的線性、環(huán)狀工具mRNA。其中線性mRNA采用化化學(xué)合成的Cap1帽結(jié)構(gòu),使線性mRNA具有高比例的天然帽子結(jié)構(gòu),修飾堿基 (N1-Methylpseudo-UTP、Pseudo-UTP、5-Methoxy-UTP、5-Methyl-CTP、N6-Methyl-ATP) 有5種可供選擇,同時(shí)使用優(yōu)化了適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的密碼子、UTR、polyA結(jié)構(gòu)。環(huán)狀mRNA通過體外轉(zhuǎn)錄生成并環(huán)化,繼而分離純化得到成品。
工具mRNA分類:
1、報(bào)告基因類
報(bào)告基因類mRNA常用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染、翻譯效率、藥物遞送、體內(nèi)成像等研究。其中愛必信EGFP mRNA是一種常用的示蹤蛋白mRNA,熒光穩(wěn)定性強(qiáng),用于表達(dá)加強(qiáng)的綠色熒光蛋白(分離自水母),發(fā)射波長為509nm,可通過熒光顯微鏡或者流式細(xì)胞術(shù)檢測,是觀察mRNA遞送、翻譯的理想工具。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60176 | EGFP mRNA | 100ug |
abs60178 | Fluc mRNA | 100ug |
abs60180 | mcherry mRNA | 100ug |
abs60192 | EBFP mRNA | 100ug |
abs60332 | Endless eGFP mRNA | 100ug |
abs60333 | Endless Fluc mRNA | 100ug |
abs60334 | Endless mcherry mRNA | 100ug |
圖 EGFP mRNA Agarose電泳條帶
圖 HEK293細(xì)胞轉(zhuǎn)染EGFP mRNA 24h后表達(dá)效果
愛必信還擁有其他報(bào)告基因類工具mRNA如tdTomato mRNA、YFP mRNA、mBanana mRNA等熒光蛋白mRNA,可用于對照驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),大家如有需要?dú)g迎來詢。
2、基因編輯類
CRISPR/Cas9是*基因編輯系統(tǒng),被廣泛用于治療各類疾病。Cas9 mRNA可在細(xì)胞內(nèi)瞬時(shí)表達(dá)Cas9蛋白,能減少免疫反應(yīng)和脫靶風(fēng)險(xiǎn)。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60174 | Cas9 mRNA | 100ug |
abs60191 | Cre mRNA | 100ug |
abs60335 | Endless Cas 9 mRNA | 100ug |
3、免疫抗原類
免疫抗原類mRNA是腫瘤免疫療法的理想研究工具。卵白蛋白 (OVA) 是絲狀蛋白超家族的一員,是在蛋清中發(fā)現(xiàn)的主要糖蛋白。是一種常用的免疫和生化研究抗原,是一種已建立的氣道高反應(yīng)性模型過敏原,可激活細(xì)胞免疫和體液免疫。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60312 | OVA mRNA | 100ug |
4、蛋白替代類
EPO mRNA用于表達(dá)人源EPO蛋白 (human erythropoietin) 。我們使用 (Abs CapTM) 在體外轉(zhuǎn)錄生產(chǎn)了EPO mRNA,化學(xué)合成的Cap1結(jié)構(gòu)使其具有高比例的天然的mRNA帽子結(jié)構(gòu),從而獲得高效的表達(dá)效果。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60194 | EPO mRNA | 100ug |
abs60336 | Endless EPO mRNA | 100ug |
工具mRNA產(chǎn)品特征:
濃度 | 1mg/mL |
狀態(tài) | 溶劑,1mM Sodium Citrate,pH 6.4 |
儲(chǔ)存溫度 | 建議分裝,低于-40℃保存,避免反復(fù)凍融 |
效期 | 建議在2個(gè)月內(nèi)使用完 |
工具mRNA產(chǎn)品優(yōu)勢:
1、Cap1型帽結(jié)構(gòu),提高mRNA穩(wěn)定性及翻譯效率,更適合哺乳動(dòng)物;
2、5種修飾可供選擇,加入修飾堿基可提高翻譯效率,降低免疫原性;
3、合適的PolyA尾結(jié)構(gòu),保證mRNA穩(wěn)定性和翻譯效率;
4、完整性高,質(zhì)控嚴(yán)格,方便研究和應(yīng)用。
用戶實(shí)驗(yàn)案例1:
用核酸轉(zhuǎn)染試劑盒(abs60259)轉(zhuǎn)染mCherry mRNA至HEK293細(xì)胞24h、48h,在熒光顯微鏡下觀察到的紅色熒光穩(wěn)定且信號強(qiáng)。(具體實(shí)驗(yàn)操作可參考核酸轉(zhuǎn)染試劑盒(abs60259)實(shí)驗(yàn)操作步驟)
圖 轉(zhuǎn)染mCherry mRNA 24h后的熒光
圖 轉(zhuǎn)染mCherry mRNA 48h后的熒光
用戶實(shí)驗(yàn)案例2
用mRNA轉(zhuǎn)染試劑(abs60339)在不同類型細(xì)胞中轉(zhuǎn)染線性工具mRNA—EGFP mRNA,處理細(xì)胞24h后利用熒光顯微鏡拍照,各種細(xì)胞都呈現(xiàn)較強(qiáng)的綠色熒光。
圖 轉(zhuǎn)染EGFP mRNA于不同類型細(xì)胞中
用戶實(shí)驗(yàn)案例3
注射線性Luciferase mRNA至活體小鼠體內(nèi),小鼠體重150ug,每針注射20uL,共計(jì)3針,3天后進(jìn)行活體成像。
圖 Luciferase mRNA注射小鼠后活體成像
FAQ:
1、工具mRNA保存條件是什么?
A:需要低于-40°C保存,-80℃冰箱或液氮保存都可以,愛必信所提供的均為新鮮生產(chǎn)的產(chǎn)品,為了達(dá)到最佳使用效果,請?jiān)谑盏截浳锏?個(gè)月內(nèi)使用。若不小心將mRNA短期(例如1天)存放于-20℃,可以在正式實(shí)驗(yàn)之前將mRNA跑瓊脂糖凝膠電泳看其是否降解。
2、工具mRNA是什么狀態(tài)?
A:我司的工具mRNA是液體狀態(tài),通用溶劑一般是1mM檸檬酸鈉鹽溶液,pH為6.4。
3、工具mRNA的貨期有多久?
A:我公司工具mRNA均為新鮮生產(chǎn)產(chǎn)品,我們收到訂單后會(huì)立即安排生產(chǎn)、發(fā)貨。一般貨期為1-2周。
4、工具mRNA的純度能達(dá)到多少?
A:線性mRNA可達(dá)到90%的純度;環(huán)狀mRNA如果長度是3-5k,可達(dá)到科研級別純度,通常能達(dá)到85%的純度。環(huán)狀mRNA序列越長,關(guān)環(huán)效率越低,純化難度越高。
5、工具mRNA推薦的帽結(jié)構(gòu)是哪一種?
A:Cap1 AG。加帽率高達(dá)95%。
6、我所需要的工具mRNA在沒有找到,怎么辦?
A:目前市面上常規(guī)的mRNA標(biāo)注品類目我公司都是有的。若我司的工具mRNA類別中沒有您所需的mRNA,您可以選擇我公司的定制合成服務(wù),我們?yōu)槟O(shè)計(jì)合成特定的mRNA。
其他相關(guān)產(chǎn)品推薦
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs60259 | 核酸轉(zhuǎn)染試劑盒 | 1.5mL |
abs60339 | mRNA轉(zhuǎn)染試劑 | 1mL |
abs7119 | 1.5mL離心管(無菌無酶) | 10盒/箱 |
abs7075 | 200uL吸頭(盒裝,無菌無酶) | 100盒/箱 |
Absin特色產(chǎn)品線:
WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動(dòng)劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...
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