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反玉米素

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更新時(shí)間:2024-11-26 10:12:59瀏覽次數(shù):305

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反玉米素
英文名稱 : Trans-Zeatin CAS : 1637-39-4 分子式 : C10H13N5O 分子量 : 219.24 儲(chǔ)存條件 : -20℃ 外觀(性狀) : 外觀: 白色或類白色粉末 單位 : 瓶

詳細(xì)介紹

反玉米素

英文名稱 : Trans-Zeatin

CAS : 1637-39-4

分子式 : C10H13N5O

分子量 : 219.24

儲(chǔ)存條件 : -20℃

外觀(性狀) : 外觀: 白色或類白色粉末

反玉米素

說(shuō)明: 是一種細(xì)胞分裂素,也是核糖核酸中(RNA)的稀有成分;可用于植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和植物細(xì)胞培養(yǎng)液配制。也有促進(jìn)植物細(xì)胞分裂作用。

特性: 溶解性:溶于冰醋酸,參考濃度50mg/ml。
S:22-24/25

慢病毒感染快速指南

1. 將目的細(xì)胞按 30%匯合度接種到 24 孔板,約 3-5×104細(xì)胞數(shù)/孔,不同細(xì)胞因?yàn)榧?xì)胞大小不同細(xì)胞數(shù)量會(huì)不同,快速指南以細(xì)胞數(shù)量為 5×104為例,加入 500uL wan全培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

2. 接種后 12-20h 感染陰性對(duì)照慢病毒(接種細(xì)胞至病毒感染細(xì)胞時(shí)間不宜太長(zhǎng),否則細(xì)胞增殖影響細(xì)胞密度不利用后期抗性篩選)。

3.加病毒量計(jì)算方法:(細(xì)胞數(shù)×MOI /病毒滴度)×103=病毒量(uL),加病毒量見(jiàn)下表。同時(shí)加入 Polybrene,每孔加 0.25uL,濃度為 10mg/mL Polybrene,細(xì)胞培養(yǎng)液中終濃度為5ug/mL

4.感染 16-20h 后更換培養(yǎng)基,棄去培養(yǎng)基,每孔加入 500uL 新鮮的培養(yǎng)基。

5.感染后 48-96h 顯微鏡觀察熒光。(注:如果 48h-96h 期間細(xì)胞匯合度達(dá)到 100%,請(qǐng)及時(shí)傳代培養(yǎng))。

6.建議將 48 孔板細(xì)胞進(jìn)行傳代,傳代 12 孔板,后繼續(xù)觀察熒光,根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)和熒光細(xì)胞比例綜合判斷細(xì)胞感染最佳 MOI 值。一般選擇細(xì)胞生長(zhǎng)良好,感染效率 80%左右的感染條件作為最佳感染條件。(注:100%熒光感染不一定為細(xì)胞最佳 MOI 值,因?yàn)榭赡軙?huì)造成細(xì)胞慢病毒感染拷貝數(shù)太高,影響細(xì)胞狀態(tài)。


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