目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>培養(yǎng)基>>Abnbio培養(yǎng)基>> AB30042Abnbio 0.25胰酶溶液 100ml
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml |
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貨號 | AB30042 | 主要用途 | 細(xì)胞培養(yǎng) |
產(chǎn)品說明: 在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散(將組織塊制備成單個細(xì)胞懸液)以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中,貼壁生長細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為,EDTA等,其功能主要是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)(如細(xì)胞外基質(zhì))水解,使組織或貼壁細(xì)胞分散成單個細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液用于進一步的實驗。 -EDTA消化液(Trypsin-EDTASolution)含0.25%和0.02?TA(0.53mM),溶于無鈣鎂鹽溶液中,經(jīng)過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化。-EDTA消化液具有方便快速、穩(wěn)定安全、細(xì)胞狀態(tài)好等特點。通常室溫消化2分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。-EDTA消化液有含酚紅和不含酚紅2類產(chǎn)品,酚紅具有pH 指示作用。
1. 貼壁細(xì)胞的消化: a) 吸去培養(yǎng)液,用無菌的PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。b) 加入少量-EDTA消化液,蓋過細(xì)胞即可,室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時間有所不同,對于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長消化時間。 c) 顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的規(guī)格100ml 100ml 備注不含酚紅含酚紅 變化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來。此時吸除消化液。加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。 d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,可加入-EDTA消化液重新消化。 e) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。 2. 組織的消化: 不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
1.由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同,實驗人員應(yīng)依據(jù)具體情況,確定最佳消化時間;消化細(xì)胞時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁和生長狀況; 2.本產(chǎn)品不含抑菌劑,在使用過程中要特別注意無菌操作,避免消化液被微生物污染; 3.不宜4℃長期保存,切忌反復(fù)凍融,小量使用時建議分裝凍存; 4.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 |
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