目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細胞>>克隆感受態(tài)細胞 非電擊>> JM110Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細胞
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50支100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | ABG007-50 | 應用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
| 主要用途 | 細胞培養(yǎng) |
JM110 Chemically Competent Cell
基因型：
rpsL (StrR) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsxdam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proABlacIqlacZΔM15]
簡要說明：
JM110菌株具有硫酸-(StrR) LIAN霉素抗性(StrR) ；是甲基化基因dam、dcm 缺失的菌株，提取得到的質(zhì)粒DNA，可被對dam、dcm甲基化敏感的內(nèi)切酶切割； lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以進行藍白斑篩選，但轉(zhuǎn)化效率不高 High5TM系列JM110感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率約107 cfu/μg。一般不用于質(zhì)粒構(gòu)建，只適用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化。
操作說明：
1.JM110感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目的DNA并用手打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
注意事項：
1.感受態(tài)細胞最好在冰上融化。冰上放置大約5分鐘即可融化，融化后不可久放，八分鐘內(nèi)加入質(zhì)粒，否則會影響轉(zhuǎn)化效率。
2.混入質(zhì)粒時應輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?？上鄳獪p少最終用于涂板的菌量。
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