U226細胞，人多發(fā)性骨髓瘤細胞

 產(chǎn)品名稱：U226

細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣

組織來源：骨髓

傳代情況：C5 

細胞數(shù)量：1~3*10⁶細胞/25cm2培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)條件：RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS　

生長條件： 95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長狀態(tài)：懸浮生長

特征特性：可產(chǎn)生免疫球蛋白輕鏈，未檢測到重鏈

存儲條件：50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮

1． 細胞資源中心為科學研究提供實驗細胞技術服務。所提供的實驗細胞及其子代，不能用于人體實驗和臨床診斷、治療，不能直接或間接用于商業(yè)行為。 2. 細胞資源中心承諾盡最大努力對實驗細胞資源相關信息進行及時更新。但限于當時的技術條件，中心不保證其準確性。 3. 從文獻等處引用的信息本中心未進行核實，僅供參考。 4. 使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉讓及使用細胞的時候要遵守國內外有關的法律法規(guī)，充分考慮可能存在的風險和責任，采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害

U226細胞，人多發(fā)性骨髓瘤細胞

對于貼壁細胞，若細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，換成新鮮的培養(yǎng)基；如細胞還不貼壁，將細胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中，原培養(yǎng)瓶加部分新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。對于懸浮細胞：收到細胞后，將細胞全部離心，去掉舊的培養(yǎng)基，換成新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

特別注意：（如使用公共實驗室或者初次接觸，建議添加雙抗培養(yǎng)）

（1）貼壁細胞收到當天有少量或沒有飄忽的細胞可以當天換液，因為路途顛簸造成大量飄忽的情況時，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)

（2）收到細胞后請盡快更換為含10%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清，（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）

（3）如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系SUER技術人員

細胞接收后的操作流程與注意事項：

1）貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度（最高不能超過20%），或可根據(jù)該細胞生長特性生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

2）如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決

3）生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）

（1）吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通?？刂圃?-2min）

（2）注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存

（3）取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)?培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

（4）鏡下觀察消化情況，在HS505.T人淋巴結成纖維樣細胞生長特性邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰酶，加6-8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。