孕烯醇酮EIA(96孔)，IVD使用：人血清酶免疫法直接定量測定孕烯醇酮。

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品孕烯醇酮EIA(96孔)，IVD使用。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

孕烯醇酮EIA(96孔)，IVD使用檢測原理：

以下酶免疫測定測試的原理遵循兩步競爭性結合場景。在第一次孵育過程中，未標記的抗原（存在于標準品、對照品和患者樣本中）和生物s標記抗原（生物s偶聯(lián)物）之間發(fā)生競爭，以獲得微板上有限數(shù)量的抗體結合位點。洗滌和潷析程序可以去除未結合的物質。在第二次孵育過程中，加入鏈霉抗生物s蛋白-HRP（HRP偶聯(lián)物）并與生物s偶聯(lián)物結合。洗滌步驟后，加入酶底物。通過加入終止溶液終止酶促反應。在微量滴定板讀數(shù)器上測量吸光度。形成的顏色強度與樣品中孕烯醇酮的濃度成反比。使用一組標準來繪制標準曲線，從中可以直接讀取患者樣本和對照中的孕烯醇酮含量。

孕烯醇酮（3β-羥基孕-5-烯-20-酮）是類固醇生物合成途徑中從d固醇衍生出的第一個類固醇，并且是所有腎上腺和性腺類固醇的共同前體。它的生成發(fā)生在線粒體中，通過P-450SCC酶對d固醇的C-20側鏈進行裂解。一旦生成，孕烯醇酮可以通過兩條類固醇生物合成途徑被利用。孕烯醇酮可以通過17α-羥化酶的酶促作用轉化為17-OH-孕烯醇酮，或通過3β-羥基類固醇脫氫酶的酶促作用轉化為孕酮。

在先天性腎上腺增生癥（CAH）的幾種形式中，由于3β-羥基類固醇脫氫酶缺乏或17α-羥化酶缺乏，會出現(xiàn)孕烯醇酮水平升高。在患有特發(fā)性多毛癥的女性中也有較高水平的報道。關于性別和年齡差異對孕烯醇酮水平影響的研究表明，女性和男性的最大水平分別出現(xiàn)在大約17歲和16歲左右，而最小水平分別出現(xiàn)在大約37歲和38歲左右?？偟膩碚f，女性的數(shù)值比男性略高。

仍有待進一步研究孕烯醇酮生理學的許多領域。當前研究表明，在血清中測定孕烯醇酮可能對研究其代謝物孕烯醇酮硫酸酯有用，已有報道該物質在哺乳動物大腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中具有多種效應。

程序注意事項和警告：

1. 用戶應充分理解本協(xié)議以成功使用此試劑盒。只有通過嚴格和仔細遵循提供的說明，才能獲得可靠的性能。

2. 建議所有客戶準備自己的控制材料或血清池，應在每次運行中包含高濃度和低濃度水平，以評估結果的可靠性。

3. 當z定使用水進行稀釋或重組時，使用去離子水或蒸餾水。

4. 為了減少接觸潛在有害物質，處理試劑盒試劑和人類樣本時應佩戴手套。

5. 所有試劑盒試劑和樣本在使用前應置于室溫并輕輕但c底混合。避免反復凍融試劑和樣本。

6. 每次運行都必須建立校準曲線。

7. 試劑盒中提供的對照應包含在每次運行中，并應落在既定的置信限內。

8. 當對照的測定值不反映既定范圍時，可能表明程序技術不當、移液不精確、洗滌不w全以及試劑儲存不當。

9. 在讀取微孔板時，孔中的氣泡會影響光密度（OD）。在執(zhí)行讀取步驟之前仔細去除任何氣泡。

10. 底物溶液（TMB）對光敏感，如果儲存得當，應保持無色。如果出現(xiàn)藍色，則不應使用，這可能表明不穩(wěn)定性或污染。

11. 分發(fā)底物和終止溶液時，不要使用這些液體會接觸到任何金屬部件的移液管。

12. 為了防止試劑污染，分配每種試劑、樣本、標準和對照時使用新的一次性移液管尖。

13. 不要在測試中混合不同批號的試劑盒組分，并且不要使用標簽上打印的過期日期之外的任何組分。

14. 試劑盒試劑必須被視為危險廢物，并根據(jù)國家規(guī)定進行處理。

典型校準器曲線

僅示例曲線。請勿用于計算結果。

文獻參考：

1. Abraham GE, et al. Radioimmunoassay of Plasma Pregnenolone, 17-hydroxypregnenolone and Dehydroepiandrosterone Under Various Physiological Conditions. JClin Endocrinol Metab. 1973; 37(1):140–4.

2. Hill M, et al. Age Relationships and Sex Differences in Serum Levels of Pregnenoloneand 17-hydroxypregnenolone in Healthy Subjects. Clin Chem Lab Med. 1999;37(4):439–47.

3. Robel P, et al. Biosynthesis and Assay of Neurosteroids in Rats and Mice. J SteroidBiochem Mol Biol. 1995; 53:355–60.

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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