化工儀器網
詳細介紹
參數規(guī)格：
產品貨號：FS-02R6583
產品規(guī)格：48T 0.2PCR管
產品分類：水產養(yǎng)殖病害檢測系列）
產品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
MCM2/FITC 熒光標記染色體維持缺陷蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TIGAR humen/FITC 熒光標記兔抗人TIGAR蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Activin A Receptor Type IB 激活受體1B抗體 0.2ml
Rabbit Bovine IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗IgM 0.1ml
GGT2 heavy chain γ谷酰轉肽2重鏈抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bov IgG/Cy7 Cy7標記的兔抗IgG 0.1ml
TIGAR humen/FITC 熒光標記兔抗人TIGAR蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Human IVIgG antibody ELISA Kit 人抗IVIgG抗體Multi-class antibodies： 48T
IL-6 白介6抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LRCH1 富含亮重復家庭蛋白1抗體 0.2ml
LPS(Human Lipopolysaccharides) ELISA Kit 人脂多糖/內 96T
RCL c-Myc應答蛋白抗體 0.2ml
Classical swine fever virus 豬瘟病毒抗體 0.2ml
IL-6 白介6抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit horse IgG/Gold 膠體金標記的兔抗馬IgG 0.5ml
GPR158 G蛋白偶聯受體GPR158蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1B1 糖還原抗體 0.2ml
Laminin alpha5/FITC 熒光標記層粘蛋白α5抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗羊IgM 0.3ml
Socs 3/FITC 熒光標記細胞因子信號傳導抑制蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
折光馬爾太蟲核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管豚鼠熱休克蛋白27（HSP-27/HSPB1）elisa檢測試劑盒
豚鼠磷脂C（PLC）elisa檢測試劑盒
大鼠轉化生長因子β1 （TGF-β1） elisa檢測試劑盒
豚鼠外基質磷糖蛋白（MEPE）elisa檢測試劑盒
大鼠肌紅蛋白（MYO）elisa檢測試劑盒
豚鼠衰老關鍵蛋白4（FBLN4）elisa檢測試劑盒
豚鼠外基質金屬蛋白誘導因子（EMMPRIN/CD147）elisa檢測試劑盒
大鼠總膽汁（TBA）elisa檢測試劑盒
大鼠白介12 p40（IL-12/p40）elisa檢測試劑盒
豚鼠糖蛋白130（gp130）elisa檢測試劑盒
豚鼠三葉因子2（TFF2）elisa檢測試劑盒
豚鼠性磷（ALP）elisa檢測試劑盒
豚鼠信號3B （SEMA3B）elisa檢測試劑盒
豚鼠纖溶原活物抑制因子1（PAI1）elisa檢測試劑盒
大鼠骨成型蛋白4（BMP-4）elisa檢測試劑盒
化工儀器網