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玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又稱F-2素,是玉米赤霉菌的代謝產(chǎn)物,具有雌激素樣作用,具有較強的生殖性和致畸作用,可引起動物發(fā)生雌激素亢進癥,導致動物不孕或流產(chǎn),對家禽、豬、牛和羊的影響較大,給畜牧業(yè)帶來很大的經(jīng)濟損失。
玉米赤霉烯酮ELISA試劑盒采用競爭ELISA,在微孔板上預包被玉米赤霉烯酮抗原,加入樣本/玉米赤霉烯酮標準品溶液及辣根過氧化物酶標記的玉米赤霉烯酮抗體。樣本或標準品溶液中的玉米赤霉烯酮與預包被在微孔板上的玉米赤霉烯酮抗原競爭結(jié)合辣根過氧化物酶標記的玉米赤霉烯酮抗體。未結(jié)合的酶標抗體在洗滌時被除去。再加入TMB顯色,讀取吸光值。樣本的吸光值與其所含殘留物玉米赤霉烯酮抗原的含量成負相關。對照標準曲線,即可得出相應殘留物玉米赤霉烯酮的含量。
【注意事項】
1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒有恢復到室溫(20~25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3. 每種試劑使用前均需搖勻。
4. 反應終止液為0.5M硫酸,避免接觸皮膚。
5. 不要使用過了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過了有效期的試劑盒;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6. 儲存條件:試劑盒保存于2~8℃,不能冷凍,將不用的微孔板重新真空密封。標準物質(zhì)和無色的顯色劑對光敏感,因此要避光保存。
7. 試劑變質(zhì)的跡象:顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì),應當棄之。0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。
8. 加入顯色液后,一般顯色時間為15~30min。若顏色較淺,可延長反應時間到35min(或更長),但不得超過40min。反之,則減短反應時間。
9. 玉米赤霉烯酮ELISA檢測試劑盒反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。
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