PAS糖原染色液又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。
原理:過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上。
PAS糖原染色液方法:
固定液
Carnoy固定液:無水
乙醇:60 ml
冰醋酸:10ml,75%
乙醇液配制
1) 過碘酸酒清配法:
過碘酸(HIO4·2H2O) 0.4g 95%
乙醇 35ml M/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml) 5ml蒸餾水10ml。
保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周。
2)Schiff氏液:
0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時(shí)時(shí)搖動三角瓶5分鐘,使之充分溶解。冷卻至50℃后過濾加入10毫升1N鹽酸,冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時(shí),然后密封冰箱保存。
3) Schiff氏
乙醇 來配置 Schiff氏液 11.5ml 1N HCI 0.5ml 無水乙醇 23ml
4) 亞硫酸水 1%偏重亞硫酸鈉10ml 1N HCI 10ml 蒸餾水 180ml的樹膠溶解。
5)哈瑞或邁耶蘇木精
染色步驟
1. 石蠟切片脫蠟至水(細(xì)胞涂片,冰凍切片直接水洗)
2. 蒸餾水洗
3. 過碘酸酒精10min;
4. 自來水沖洗10min
5. Schiff氏液10min
6. 流水沖洗5min
7.用哈瑞蘇木精 或邁耶蘇木精染核3min(細(xì)胞核染色過深可用 鹽酸酒 精 分化)
8. 流水沖洗5min
9. 常規(guī)脫水、透明、封固
結(jié)果
PAS陽性為紅色,細(xì)胞核藍(lán)色。
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