步驟
細(xì)胞準(zhǔn)備與標(biāo)記:首先,需要準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)募?xì)胞模型,并在特定條件下培養(yǎng)。隨后,使用特定的熒光標(biāo)記物對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色或轉(zhuǎn)染,以標(biāo)記感興趣的細(xì)胞結(jié)構(gòu)或分子。
高內(nèi)涵成像:將標(biāo)記好的細(xì)胞置于高內(nèi)涵成像系統(tǒng)中,該系統(tǒng)通常配備有高分辨率的顯微鏡和數(shù)碼相機(jī)。系統(tǒng)能夠自動(dòng)捕捉并分析多孔板(如96孔或384孔板)中每個(gè)孔的細(xì)胞圖像。
數(shù)據(jù)采集:成像系統(tǒng)會(huì)對(duì)每個(gè)孔中的細(xì)胞進(jìn)行多通道、多靶點(diǎn)的圖像采集。這些圖像數(shù)據(jù)包含了細(xì)胞形態(tài)、熒光強(qiáng)度、細(xì)胞分布等多方面的信息。
數(shù)據(jù)預(yù)處理:采集到的原始圖像數(shù)據(jù)需要經(jīng)過(guò)預(yù)處理,如背景減除、噪聲消除等,以提高圖像質(zhì)量和分析的準(zhǔn)確性。
分析方法
圖像分割與識(shí)別:利用專業(yè)的圖像處理軟件,對(duì)預(yù)處理后的圖像進(jìn)行分割和識(shí)別,將每個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群從背景中分離出來(lái)。
特征提取:針對(duì)每個(gè)識(shí)別出的細(xì)胞或細(xì)胞群,提取其形態(tài)、熒光強(qiáng)度、紋理等特征參數(shù)。這些特征將用于后續(xù)的統(tǒng)計(jì)分析。
統(tǒng)計(jì)分析與數(shù)據(jù)挖掘:利用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法和機(jī)器學(xué)習(xí)算法,對(duì)提取出的特征參數(shù)進(jìn)行分析。通過(guò)比較不同處理組之間的差異,篩選出具有顯著效應(yīng)的候選藥物或處理?xiàng)l件。
結(jié)果可視化與報(bào)告:將分析結(jié)果以圖表、熱圖等形式進(jìn)行可視化展示,便于研究人員直觀理解實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。同時(shí),生成詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)報(bào)告,以供后續(xù)研究參考。
高內(nèi)涵細(xì)胞成像與篩選服務(wù)通過(guò)高分辨率成像和自動(dòng)化分析技術(shù),為藥物研發(fā)、細(xì)胞生物學(xué)研究等領(lǐng)域提供了強(qiáng)有力的工具。它不僅能夠大幅提高篩選效率,還能揭示細(xì)胞對(duì)藥物或其他處理?xiàng)l件的綜合響應(yīng),從而加速科研進(jìn)程并推動(dòng)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新。