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八臂迷宮(放射臂迷宮(radial arm maze))實驗也是常用的評價動物學習記憶能力的模型之一,由Olton等人于20世紀70年代中期建立。其基本依據(jù)是,控制進食的動物受食物的驅使對迷宮各臂進行探究;經(jīng)過一定時間的訓練,動物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時測定動物的工作記憶(working memory)和參考記憶(reference memory)。所用動物包括大鼠、小鼠和鴿子。這一模型對腦區(qū)毀損和多種藥物均很敏感。
(一) 實驗設備 實驗多數(shù)采用八臂放射迷宮,也有采用 十二臂或者二十四臂迷宮。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的八臂迷宮。每個臂長41.9cm,寬11.4cm,高10.1cm;其上有一透明蓋,兩側各有兩個相對的光電管。迷宮中央八角形區(qū)的直徑為27.4cm;上有一透明頂蓋。中央?yún)^(qū)通往各臂的入口處有一活動門,用來對動物的出入臂進行控制。迷宮與計算機相聯(lián)。也可用攝像跟蹤系統(tǒng)(video tracking system)取代光電管來記錄動物在迷宮內的活動行為。放置迷宮的房間內有一些外部暗示(extramaze cues)。動物在迷宮內可以看見這些暗示,并借此進行空間定位。實驗用大鼠或小鼠進行。
(二)實驗方法
1.動物適應實驗環(huán)境1周后,稱重,禁食24小時。此后每天訓練結束后限制性地給予正常食料(據(jù)體重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使體重保持在正常進食大鼠的80%~85%。
2.第二天,迷宮各臂及中央?yún)^(qū)分撒著食物顆粒(每只4~5粒,直徑約3~4mm)。然后,同時將4只動物置于迷宮中央(通往各臂的門打開)。讓其自由攝食、探究10min。
3.第三天,重復第二天的訓練。這一過程讓動物在沒有很強的應激條件下熟悉迷宮環(huán)境。
4.第四天起,動物單個進行訓練:在每個臂靠近外端食盒處各放一顆食粒,讓動物自由攝食。食粒吃完或10min后將動物取出。
5.第五天,將食物放在食盒內,重復前一天的訓練,一天2次。
6.第六天以后,隨機選4個臂,每個臂放一顆食粒;各臂門關閉,將動物放在迷宮中央;30s后,臂門打開,讓動物在迷宮中自由活動并攝取食粒,直到動物吃完所有4個臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完,則實驗終止。每天訓練兩次,其間間隔1h以上。
記錄以下幾個指標:
○1工作記憶錯誤(working memory errors)次數(shù),即在同一次訓練中動物進入食物臂的總次數(shù)-1次;
○2參考記憶錯誤(reference memory errors )次數(shù),即動物進入不曾放過食粒的臂的總次數(shù);
○3總的入臂次數(shù);
○4成功進入潛伏期,即動物di一次進入食物臂的時間;
○5錯入潛伏期,即動物di一次進入未放食物的臂的時間;
此外,計算機還可記錄動物在放射臂內及中央?yún)^(qū)的活動情況,包括運動距離和運動時間等。
連續(xù)5次訓練的工作記憶錯誤為零、參考記憶錯誤不超過1次時,可以開始藥物測試或腦內核團結構毀損實驗。一般先給溶劑(如生理鹽水),再給削弱記憶的藥物(如東~~~~MK-801等),然后加用增強記憶的藥物,劑量由低到高。
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