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NBP1-71648 Novus  大量現(xiàn)貨，歡迎電聯(lián)，真誠合作共贏。

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Novus代理 北京華新康信生物科技有限公司

產(chǎn)品列表如下：

產(chǎn)品貨號(hào)       產(chǎn)品名稱       品牌

NBP1-71648  Mouse Monoclonal mtTFA Antibody (18G102B2E11)       NOVUS

H00011232-B01P Mouse Polyclonal POLG2 Antibody    NOVUS

NB110-7081H      Mouse anti-Human IgG4 Fc fragment Secondary Antibody (5C7) [HRP] novus

NBP1-78159  Mouse Monoclonal LDL R Antibody (C7)   NOVUS

NB100-56698       Rabbit Polyclonal MyD88 Antibody [IMGENEX: IMG-178]       NOVUS

NBP2-62766  Human HMGB1/HMG-1 ELISA Kit (Colorimetric)     NOVUS

NBP1-47518AF488      Calreticulin Antibody (1G6A7) [Alexa Fluor 488]       novus

北京華新康信生物科技有限公司專注于生命科學(xué)領(lǐng)域，由豐富從業(yè)經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)和管理團(tuán)隊(duì)組建而成，主營生物化學(xué)試劑，儀器，實(shí)驗(yàn)耗材等。

1廣泛的產(chǎn)品輻射領(lǐng)域，試劑，耗材，儀器等。

2產(chǎn)品種類齊全，北京華新康信與國外諸多生命科學(xué)領(lǐng)域*合作眾多，代理品牌Glycan Therapeutics，Intact Genomics，Integral Molecular，Medkoo，Niomech，Terragene，Anshlabs wako，EZbioscience，CMCTAG，Anatrance ，F(xiàn)avorage ，Affinity，Advanced biomatrix，bioplastics，天地人和，TRC，凱杰，義翹，sciencell；價(jià)格優(yōu)勢(shì)品牌：seracare，Streck，Toxin，Zeptometrix，sigma，F(xiàn)orteBio，CanSyn，Novus，santa，chormsystems，bethyl ，moltox， permagenlabware ，bioflux，Bio－Rad， coriell，   listlabs， ZYMO ， ABclonal  ， EY laboratories  ，greatcellsolar ， agdia ， beckman ， Bioxcell，，biomax ，usascientific ， TRC ，novus ，americanelements，cayman  ， Fisher ，thermofisher ，  nanopore，   日立，  三菱株式會(huì)社 ，RD， takara等，緊跟生命科學(xué)的發(fā)展，不斷滿足客戶的需求，為各位的科研之路上添磚加瓦！

3 一手貨源，價(jià)格優(yōu)勢(shì)明顯

4信譽(yù)良好，客戶范圍廣，包括清華、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校，百泰藥業(yè)，康龍化成，藥明康德等企業(yè)。

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肽封閉-一種確認(rèn)抗體特異性的方法。

背景：抗體與目標(biāo)表位的特異性結(jié)合是產(chǎn)生準(zhǔn)確表達(dá)數(shù)據(jù)所必需的?？贵w與非靶標(biāo)抗原的結(jié)合（也稱為非特異性結(jié)合）會(huì)增加背景信號(hào)并使數(shù)據(jù)解釋復(fù)雜化。在蛋白質(zhì)印跡分析中，通常會(huì)通過多個(gè)條帶輕松識(shí)別非特異性結(jié)合。但是，在免疫組織化學(xué)，ELISA，流式細(xì)胞儀，ChIP和其他基于抗體的應(yīng)用中，非特異性抗體結(jié)合的鑒定可能更加困難。

什么是封閉肽？封閉肽是由對(duì)應(yīng)于抗體表位（抗體識(shí)別的抗原的特定片段）的氨基酸序列組成的肽。阻斷肽將與靶抗體特異性結(jié)合，從而防止隨后的抗體與靶表位結(jié)合。

 

封閉肽如何發(fā)揮作用？可以利用抗體對(duì)其表位的高親和力來確認(rèn)結(jié)合特異性。用足夠的肽對(duì)抗體進(jìn)行預(yù)溫育會(huì)占據(jù)所有抗體結(jié)合位點(diǎn)，從而阻止樣品中后續(xù)靶蛋白的結(jié)合。

運(yùn)行封閉肽測(cè)定后如何知道我的抗體是否特異性？為了確認(rèn)抗體的特異性，比較用對(duì)照抗體和封閉抗體染色的樣品之間的信號(hào)強(qiáng)度。如果抗體對(duì)目標(biāo)表位具有特異性，則與封閉抗體一起孵育的實(shí)驗(yàn)樣品將顯示出比對(duì)照抗體（單獨(dú)的抗體，未封閉）弱的信號(hào)。

在Western blot中我的肽封閉數(shù)據(jù)應(yīng)該是什么樣的？如果抗體與過量的肽一起孵育并且所有結(jié)合位點(diǎn)都被占據(jù)（封閉），則與封閉抗體一起孵育的樣品應(yīng)無信號(hào)。

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蛋白質(zhì)印跡法

介紹

蛋白質(zhì)印跡使用抗體來識(shí)別細(xì)胞或組織裂解物中的單個(gè)蛋白質(zhì)?？贵w與高度特異性的氨基酸序列結(jié)合，稱為表位。由于氨基酸序列因蛋白質(zhì)而異，因此蛋白質(zhì)印跡分析可用于鑒定和定量包含數(shù)千種不同蛋白質(zhì)的裂解物中的單個(gè)蛋白質(zhì)。先，通過SDS-PAGE凝膠電泳根據(jù)蛋白質(zhì)的大小將蛋白質(zhì)彼此分離。接下來，通過施加電流將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。然后可以用對(duì)目標(biāo)靶蛋白具有特異性的一抗處理該膜。下一個(gè)，

裂解液的制備

亞細(xì)胞定位    推薦緩沖液

全細(xì)胞裂解液       NP-40

核    里帕

線粒體    里帕

細(xì)胞質(zhì)    鹽酸

膜結(jié)合蛋白    里帕

吸出PBS，并加入冰冷的裂解緩沖液（每融合10 7個(gè)細(xì)胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL ）。請(qǐng)參見下表，以根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞位置推薦裂解緩沖液。

用冰冷的PBS在冰上洗滌細(xì)胞培養(yǎng)皿。

吸出PBS，并加入冰冷的裂解緩沖液（每融合10 7個(gè)細(xì)胞/ 100mm皿/ 150 cm 2燒瓶加入1 mL ）。請(qǐng)參見下表，以根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞位置推薦裂解緩沖液。

使用細(xì)胞刮刀，將粘附的細(xì)胞從培養(yǎng)皿上刮下來，并將細(xì)胞懸浮液轉(zhuǎn)移到微量離心管中。如果需要，可以將細(xì)胞用胰蛋白酶消化并用PBS洗滌，然后再重懸于裂解緩沖液中。

在4°C下攪拌細(xì)胞30分鐘。

在4°C下離心細(xì)胞裂解液混合物。時(shí)間和離心力因每種細(xì)胞類型而異，但是一般指導(dǎo)原則是在12,000 rpm下20分鐘。

將上清液（裂解液）轉(zhuǎn)移到冰上的新試管中。

樣品制備

確定每個(gè)細(xì)胞裂解液的蛋白質(zhì)濃度。

確定要加載的蛋白質(zhì)量（推薦：10-50μg/泳道），并添加等體積的2X Laemmli緩沖液。

通過將裂解液在樣品緩沖液中于95-100°C下煮沸5分鐘來減少樣品并使樣品變性。僅在抗體數(shù)據(jù)表建議使用非還原或非變性條件時(shí)才應(yīng)跳過此步驟。