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感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化

感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化。

 

我們提供了幾種類型的感受態(tài)細(xì)胞，供您在克隆實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行轉(zhuǎn)化。我們的恒星感受態(tài)細(xì)胞有兩種形式，化學(xué)感受態(tài)和電感受態(tài)細(xì)胞?；瘜W(xué)感受態(tài)恒星感受態(tài)細(xì)胞用氯化鈣處理，以協(xié)助質(zhì)粒DNA附著在感受態(tài)細(xì)胞膜上，而恒星感受態(tài)細(xì)胞則準(zhǔn)備通過電穿孔轉(zhuǎn)化。兩種格式均使用可提供高轉(zhuǎn)化效率的大腸桿菌 HST08菌株，并且已針對(duì)In-Fusion HD Cloning Plus產(chǎn)品進(jìn)行了優(yōu)化（包括在其中）。

 

從我們的化學(xué)感受態(tài)和電感受態(tài)電池中選擇：、

大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

我們提供幾種類型的感受態(tài)細(xì)胞，用于重組DNA克隆實(shí)驗(yàn)，例如文庫制備，重組質(zhì)粒制備或亞克隆。我們的幾種大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞可用于通用克隆，包括JM109，HB101和DH5 alpha，而我們的其他產(chǎn)品可用于特定應(yīng)用。HST08用于克隆甲基化的DNA和較大的DNA片段，包括大于10 kb的片段，而HST16CR是HST08的低拷貝數(shù)衍生物，可用于處理毒性基因。HST02可用作M13噬菌體的宿主或用于文庫制備或亞克隆，而CJ236則可用于制備單鏈含尿嘧啶的DNA，以通過Kunkel方法選擇定點(diǎn)突變。后是BMH71-18mutS（產(chǎn)品可用性因地區(qū)而異）可用于定點(diǎn)誘變，而MV1184可用于選擇琥珀色突變體。

 

大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是使用改良的Hanahan方法通過鈣離子處理制備的，其轉(zhuǎn)化效率*。對(duì)細(xì)胞進(jìn)行測(cè)試，以確保轉(zhuǎn)化效率少為1 x 10 7個(gè)菌落/ 1 µg測(cè)試質(zhì)粒（對(duì)于CJ236，MV1184和BMH71-18 mutS）或少1 x 10 8個(gè)菌落/ 1 µg測(cè)試質(zhì)粒

 

9053       大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞CJ236 10 x 100 ul  Takara

大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞：DH5-alpha，JM109，HSTO8等用于重組DNA克隆實(shí)驗(yàn)，例如文庫制備，質(zhì)粒制備和亞克隆。

9054       大腸桿菌BMH71-18 mutS感受態(tài)細(xì)胞    10 x 100微升               Takara

9057       大腸桿菌DH5a感受態(tài)細(xì)胞 10 x 100 ul            Takara

9051       大腸桿菌HB-101感受態(tài)細(xì)胞    10 x 100 ul            Takara

 

應(yīng)用領(lǐng)域

重組DNA克隆實(shí)驗(yàn)，例如文庫制備，重組質(zhì)粒的產(chǎn)生或亞克隆

定點(diǎn)誘變（HST02和BMH71-18 mutS）

克隆甲基化DNA（HST08或HST16CR）

克隆大的DNA片段（HST08或HST16CR）

純度

用100 µl 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞接種含有100 µg / ml氨芐青霉素的LB-瓊脂培養(yǎng)基后，沒有形成菌落。

 

基因型

大腸桿菌 HB101（目錄號(hào)9051）：   E14 - （ MCRA - ），蘇培 44， RELA 1，Δ（ LAC-proAB）/ F” [ TRAD 36， proAB +， LAC我q， lacZ啟動(dòng) ΔM15]

 

大腸桿菌 CJ236（目錄號(hào)9053）：DUT 1， UNG 1， THI -1， RELA 1 / pCJ105（F”凸輪- [R ）

 

大腸桿菌 BMH71-18 mutS的（目錄號(hào)9054）： Δ（ LAC-proAB），蘇培，THI -1， mutS的 215 :: Tn的 10（ TET - [R）/ F” [ TRAD 36， proAB +， LAC我q， lacZ的 ΔM15]

 

大腸桿菌 MV1184（目錄號(hào)9055）：ARA，Δ（ LAC-proAB）， rpsL的，THI（ø80的lacZ ΔM15），Δ（ SRL-的recA）306 :: Tn的 10（ TET - [R）/ F'[ TRAD 36 ， proAB +， LAC我q， lacZ啟動(dòng) ΔM15]

 

大腸桿菌 HST02（目錄號(hào)9127）： F” [ TRA D36，親甲 +乙 +， LAC我 q， lac啟動(dòng) ZΔM15] /Δ（ lac啟動(dòng) -親 AB）， REC A，端 A， GYR A96， THI， E14 - （ MCR甲 - ）， SUP E44，相對(duì) A，Δ DEO R，Δ（ MRR - HSD RMS- MCR BC）

 

大腸桿菌 DH5α（目錄號(hào)9057）： ?F -，ø80d lacZ啟動(dòng) ΔM15，Δ（ lacZYA-ARGF）U169， DEO R， recA啟動(dòng) 1，恩達(dá) 1， HSDR 17（R ? - ，米 ? +）， phoA啟動(dòng)，蘇培 44，λ–， thi -1， gyrA 96， relA 1

 

大腸桿菌  HST08（目錄號(hào)9128）： F-，恩達(dá) 1，蘇培 44， THI -1， recA啟動(dòng) 1， RELA 1的gyrA 96， phoA啟動(dòng)，ø80d lacZ啟動(dòng) ΔM15，Δ（ lacZYA-ARGF）U169，Δ（ MRR -HSD RMS- MCR BC），Δ MCR A，λ-

 

大腸桿菌 HST16CR（目錄號(hào)9131）： F-，恩達(dá) 1，蘇培 44， THI -1， recA啟動(dòng) 1， RELA 1的gyrA 96， phoA啟動(dòng)，ø80d lacZ啟動(dòng) ΔM15，Δ（ lacZYA-ARG F）U169，Δ（ MRR-HSD RMS- MCR BC），Δ MCR A，Δ PCN B，λ-

 

每種菌株的用途

大腸桿菌 HB101： HB101保持穩(wěn)定的基因型。它用作重組DNA實(shí)驗(yàn)的通用菌株。

 

大腸桿菌 JM109： JM109用于α互補(bǔ)（藍(lán)/白篩選），其中通過篩選β-半乳糖苷酶活性來鑒定含有重組質(zhì)粒的克隆。在F”的JM109游離體包括 lacZ的 ΔM15。如果宿主細(xì)胞在MCS區(qū)域中包含編碼 lacZα的質(zhì)粒（例如pUC載體），則在X-gal存在下鋪板時(shí)，菌落將顯示為藍(lán)色。如果質(zhì)粒的MCS區(qū)域中的 lacZ alpha已被插入片段破壞，則在X-gal存在下進(jìn)行鋪板時(shí)，所得菌落將顯示為白色。JM109可用于制備ssDNA以及用于文庫構(gòu)建和亞克隆。

 

大腸桿菌 CJ236：CJ236用于制備含尿嘧啶的ssDNA（Kunkel方法）。CJ236是DUT - UNG -并由此缺乏dUTPase和尿嘧啶DNA糖基化酶，從而導(dǎo)致脫氧尿苷的錯(cuò)誤摻入代替一些胸苷殘基。Kunkel的定點(diǎn)誘變方法利用該菌株作為pUC118 / 119或M13噬菌體的宿主來制備模板ssDNA。F'附加體（pCJ105）的穩(wěn)定維護(hù)需要在氯霉素存在下進(jìn)行培養(yǎng)。

 

大腸桿菌 BMH71-18 mutS： BMH71-18 mut S用于定點(diǎn)誘變，缺乏修復(fù)錯(cuò)配DNA的能力。因此，該宿主抑制了錯(cuò)配位點(diǎn)的修復(fù)并提高了誘變效率。

 

大腸桿菌 MV1184： MV1184用于選擇琥珀色突變體。MV1184包含F(xiàn)'附加體，可用作M13噬菌體載體或噬菌粒載體宿主以制備ssDNA。

 

大腸桿菌 HST02： HST02包含F(xiàn)'附加體，可用作M13宿主，制備DNA文庫或用于亞克隆。HST02的限制性減表型（ mcrA， mrr-mcr BC hsd RMS）能夠有效克隆甲基化DNA。HST02可用于α互補(bǔ)（藍(lán)/白篩選），其中通過篩選β-半乳糖苷酶活性來鑒定含有重組質(zhì)粒的克隆。  

 

大腸桿菌 DH5α： DH5 alpha是常用的大腸桿菌通用克隆菌株。它可用于α互補(bǔ)（藍(lán)色/白色）篩選，其中包含重組質(zhì)粒的克隆可通過篩選β-半乳糖苷酶活性來鑒定，例如，與pUC載體結(jié)合使用。DH5 alpha不攜帶lacl q，因此在進(jìn)行藍(lán)/白篩選時(shí)不需要IPTG，從而使篩選步驟更加經(jīng)濟(jì)。 

 

大腸桿菌  HST08： HST08缺少限制外源甲基化DNA所需的基因（ mrr， hsd RMS， mcr BC和 mcr A）。當(dāng)與TaKaRA DNA連接試劑盒LONG（目錄號(hào)6024）結(jié)合使用時(shí)，建議克隆大于10 kb的大插入片段。HST08可用于包括克隆甲基化DNA在內(nèi)的廣泛應(yīng)用。

二混合和一混合系統(tǒng)

兩混合和一混合系統(tǒng)

 

Matchmaker Gold系統(tǒng)是我們廣受歡迎的Matchmaker產(chǎn)品系列的，性能的版本，用于研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用和蛋白質(zhì)-DNA相互作用。這是由于新的酵母菌株，嚴(yán)格的報(bào)告基因，易于使用的文庫，表達(dá)載體和基于SMART的文庫構(gòu)建試劑盒的結(jié)合。

 

北京華新康信生物科技有限公司代理Takara品牌。北京華新康信生物科技有限公司是 Takara品牌代理商。

產(chǎn)品列表如下：

產(chǎn)品貨號(hào)       產(chǎn)品名稱       品牌

R04    PrimeSTAR® Max DNA Polymerase  takara

1010S     BamH I   TAKARA

1080S     Sal I       TAKARA

1060A     Hind III   TaKaRa

1010A     BamH I   TaKaRa

1080A     Sal I TaKaRa

1040A     EcoR I     TaKaRa

1078A     Sac I TaKaRa

1166A     Not I       TaKaRa

1068A     Kpn I      TaKaRa

1094A     Xho I      TaKaRa

1093A     Xba I       TaKaRa

4019       dNTP Mixture TaKaRa

R001A    TaKaRa Taq™ TaKaRa

RR002A  "      TaKaRa LA Taq®" TaKaRa

2011A     T4 DNA Ligase      TaKaRa

2641A     Reverse Transcriptase M-MLV (RNase H-) TaKaRa

2313A     Recombinant RNase Inhibitor     TaKaRa

1010A     BamH I   TAKARA

1060A     Hind III   TAKARA

RR02MA Takara LA Tap     TAKARA

1068AH  Kpn I      TAKARA

1094AH  Xho I      TAKARA

2011B     T4 DNA Ligase      TAKARA

6013       pMD19-T Vector Cloning Kit      TAKARA

1060AH  Hind III   TAKARA

3801              takara

3805              takara

3428B (A × 2) DL5,000 DNA Marker   Takara

3427B (A × 2) DL2,000 DNA Marker   Takara

R045B     PrimeSTAR Max DNA Polymerase     Takara

RR02MA TaKaRa LA Tap      TaKaRa

R500A    TaKaRa Taq   takara

T9300A   TaKaRa BCA Protein Assay Kit    takara

r050b     PrimeSTAR GXL DNA Polymerase      takara

6013       pMD ™ 19-T Vector Cloning Kit TAKARA

1080AH  Sal I TAKARA

RR02MA TaKaRa LA Taq®  TAKARA

1080AH  Sal I TAKARA

2313a     Recombinant RNase Inhibitor     TAKARA

3805              TAKARA

4019       dNTP Mixture TAKARA

 2641B   Reverse Transcriptase M-MLV (RNase H-) TAKARA

3805              TAKARA

4019       dNTP Mixture TAKARA

6011             takara

3805       Oligo (dT)18 Primer     TAKARA

4019       dNTP Mixture TAKARA

R050b     PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase   takara

rr02ag    TaKaRa LA Taq with GC Buffer    takara

R04    PrimeSTAR® Max DNA Polymerase  takara

638316   Mir-X™ miRNA First Strand Synthesis Kit  takara

6028       Mighty TA-cloning Kit  TaKaRa

639536   SMARTScribe反轉(zhuǎn)錄酶 takara

RR003A  Premix Taq™ DNA Polymerase (Ex Taq™ Version 2.0)     takara

北京華新康信生物科技有限公司Takara品牌下產(chǎn)品種類繁多，不僅以下列出明細(xì)，如若想找尋理想產(chǎn)品，可以電聯(lián)，竭誠為您服務(wù)。

產(chǎn)品貨號(hào)       產(chǎn)品名稱       品牌    代理公司

代理 北京華新康信生物科技有限公司

 

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