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產(chǎn)量最高的新生兒心肌細(xì)胞分離

貓?zhí)枺?span>nc-6031

科學(xué)家的正確策略

大多數(shù)關(guān)于新生大鼠或小鼠肌細(xì)胞分離的方法不僅是耗時耗力的過程，而且會產(chǎn)生研究人員最關(guān)心的低細(xì)胞活力。

需要更多細(xì)胞來研究細(xì)胞生長、分化和死亡的細(xì)胞和分子機(jī)制的科學(xué)家會發(fā)現(xiàn)，他們的實(shí)驗(yàn)不可能獲得低產(chǎn)量的細(xì)胞。

高性能系統(tǒng)

使用最新更新的心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)，您將*消除所有這些問題，并在一小時內(nèi)獲得最健康和最大產(chǎn)量的新生兒心肌細(xì)胞。

新生大鼠或小鼠心肌細(xì)胞分離系統(tǒng)無風(fēng)險，保證滿意。

隔離步驟

  產(chǎn)品

  貓 ＃    尺寸     價格

  Neomyt 試劑盒   nc-6031      6 次     415 美元

  SureCoat（用于培養(yǎng)板涂層）   SC-9035      500 毫升  

  115 美元

  NS培養(yǎng)基（含血清）       m-8031       500 毫升  

  175 美元

  NW 培養(yǎng)基（不含血清）

  m-8032       500 毫升     124 美元

  * 1 rxn 可以做 5 - 35 顆新生大鼠心臟，20 - 80 顆小鼠心臟

  * Neomyt 試劑盒中不包含 NS 培養(yǎng)基和 NW 培養(yǎng)基

非病毒哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)

轉(zhuǎn)基因表達(dá)系統(tǒng)

 

非病毒轉(zhuǎn)基因

表達(dá)系統(tǒng)

誘導(dǎo)表達(dá)

向量系統(tǒng)

miRNA表達(dá)載體

基于 miRNA 的

基因敲除

小環(huán) miRNA

表達(dá)載體

通過訂購我們的產(chǎn)品，您已閱讀并同意我們的 條款和條件

miRNA 表達(dá)載體

Cellutron 為您提供強(qiáng)大的 miRNA 工具來檢查 miRNA 對細(xì)胞功能和表型的影響。有數(shù)百種庫存載體可用于您選擇的天然 miRNA 和 antagomiR 過表達(dá)。此外，Cellutron 還構(gòu)建了用于表達(dá)人工 miRNA 的表達(dá)載體，這些人工 miRNA 被設(shè)計成與您的目標(biāo)基因具有 100% 的同源性，從而阻斷基因表達(dá)。

Cellutron miRNA expression vectos 允許您：

1. 表達(dá)人工 miRNA 以敲低靶基因的表達(dá)。

2. 高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類型，包括：分裂細(xì)胞、非分裂細(xì)胞、成體和胚胎干細(xì)胞以及iPS細(xì)胞。

3. 在體內(nèi)和體外有條件地表達(dá)您選擇的 miRNA。

4. 生成用于長期 miRNA 表達(dá)的穩(wěn)定細(xì)胞系。

一般 miRNA 通路

 

MicroRNAs (miRNAs) 是長度為 21 到 25 個核苷酸的小型非編碼 RNA，它們通過與 3' 非翻譯區(qū)以及可能與靶 mRNA 的編碼序列進(jìn)行堿基配對來調(diào)節(jié)基因表達(dá)，從而導(dǎo)致翻譯抑制或降解。

 

miRNA 由 RNA 聚合酶 II 轉(zhuǎn)錄，可以來源于單個 miRNA 基因、蛋白質(zhì)編碼基因的內(nèi)含子或通常編碼多個密切相關(guān)的 miRNA 的多順反子轉(zhuǎn)錄物。Pri-miRNAs 通常有幾千個堿基長，在細(xì)胞核中被 RNase Drosha 加工成 70-100 個核苷酸長的發(fā)夾狀前體，稱為 pre-miRNAs。在轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)后，pre-miRNA 被 RNA 核酸內(nèi)切酶 Dicer 進(jìn)一步加工以產(chǎn)生雙鏈 miRNA。

 

然后將此 miRNA 雙鏈體整合到稱為 RNA 誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物 (RISC) 的多組分蛋白質(zhì)復(fù)合物中。在此過程中，miRNA雙鏈體的一條鏈被選擇為成熟的miRNA，而另一條鏈通常被快速去除和降解。miRNA 5' 末端的核苷酸 2-8 被命名為“種子序列"，因?yàn)樵搮^(qū)域似乎對 mRNA 靶標(biāo)識別特別重要。

 

miRNA在真核生物中非常保守，在基因表達(dá)和調(diào)控中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。

 

誘導(dǎo)表達(dá)載體系統(tǒng)

 

Cellutron 利用 Cre-Loxp 技術(shù)開發(fā)了一種新型可誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)，并提供了調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)基因表達(dá)的能力。該系統(tǒng)包含兩個具有強(qiáng) CAG 啟動子的表達(dá)載體，用于高效基因表達(dá)。pEGFP/RFP-miRNA-BL 和 pEGFP/RFP-T2A-GOI-BL 是具有 EGFP 和 3X 終止序列的表達(dá)載體，其兩側(cè)有兩個 loxP 位點(diǎn)，然后是用于表達(dá) RFP 和 miRNA 或蛋白質(zhì)編碼轉(zhuǎn)基因的共順反子序列. 此外，在 miRNA 和蛋白質(zhì)編碼轉(zhuǎn)基因的表達(dá)盒下游克隆了一個殺稻瘟素 (BL) 表達(dá)盒（用于哺乳動物細(xì)胞中的藥物選擇）。與誘導(dǎo)型表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染需要 pCreER-IRES-Puro。

 

共轉(zhuǎn)染后，系統(tǒng)最初只表達(dá) EGFP，這是一種方便監(jiān)測轉(zhuǎn)染效率的報告蛋白。可以在體外和體內(nèi)添加 4-OHT 以激活 Cre 重組酶的條件活性形式，從而導(dǎo)致 miRNA 或蛋白質(zhì)編碼轉(zhuǎn)基因的高水平和受調(diào)控的表達(dá)。

 

 

 

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其他的這些是菌株

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