詳細(xì)介紹
產(chǎn)品貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 品牌 |
22980-5g | EDC | Pierce |
21555-1g | DSS | Pierce |
疫情期間Pierce品牌大力度讓利活動(dòng)開始了。北京華新康信生物科技有限公司,進(jìn)行產(chǎn)品*活動(dòng),幾百種產(chǎn)品大量現(xiàn)貨。PiercePierce北京代理 Pierce華北代理,Pierce華東代理,Pierce華南代理, Pierce華中代理,Pierce代理,Pierce 代理,Pierce代理 北京華新康信生物科技有限公司 Pierce產(chǎn)品,Pierce現(xiàn)貨,Pierce各系列產(chǎn)品,Pierce知識(shí)介紹,Pierce技術(shù)服務(wù),Pierce咨詢服務(wù),Pierce合作服務(wù),歡迎電聯(lián),真誠合作,合作共贏。Pierce一級(jí)代理
EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽) Pierce一級(jí)代理
貨號(hào):: 22980
描述
Thermo Scientific Pierce EDC是一種可與羧基和胺反應(yīng)的零長度交聯(lián)劑。EDC先與羧基反應(yīng)并形成胺反應(yīng)性O(shè)-?;咫逯虚g體,該中間體與氨基迅速反應(yīng)形成酰胺鍵并釋放出脲脲副產(chǎn)物。中間體在水溶液中不穩(wěn)定,因此兩步偶聯(lián)過程依賴于N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)來穩(wěn)定。不能與胺反應(yīng)將導(dǎo)致中間體水解,羧基再生和釋放N-取代的尿素。副反應(yīng)是N-酰基脲的形成,其通常限于位于蛋白質(zhì)疏水區(qū)域的羧基。
Thermo Scientific No-Weigh產(chǎn)品是以預(yù)分裝的形式提供的特殊試劑。預(yù)稱重的包裝通過消除小瓶的重復(fù)打開和關(guān)閉來防止試劑隨時(shí)間的流逝和污染。這種形式可以每次使用新鮮的試劑瓶,從而避免了稱量少量試劑的麻煩,并減少了對(duì)試劑穩(wěn)定性的擔(dān)憂。
EDC的特征:
• 反應(yīng)性基團(tuán):碳二亞胺
• 反應(yīng)目標(biāo):活化羧基與氨基(伯胺)結(jié)合
• 幾種共軛策略 -EDC與目標(biāo)基團(tuán)單獨(dú)反應(yīng)或包括NHS或Sulfo-NHS以提高反應(yīng)效率或穩(wěn)定活性中間體,以便以后與胺反應(yīng)
• 中性鍵-在羧基和胺之間形成中性酰胺鍵
• 水溶性試劑-直接添加在生理緩沖液中的反應(yīng)
• 可溶性反應(yīng)副產(chǎn)物 -易于洗滌可以與水或稀酸一起使用
• 高純度結(jié)晶試劑 -用于產(chǎn)生高質(zhì)量的活化衍生物
EDC的特性
•分子式:C 8 H 17 N 3 ·HCl
•分子量:191.7
•間隔臂長度:0Å
• CAS號(hào):25952-53-8
•反應(yīng)性基團(tuán):碳二亞胺
•反應(yīng)性:在pH 4.7–6.0(佳)下與羧基形成活性中間體,然后該中間體與伯胺反應(yīng)
1-乙基-3- [3-二甲基氨基丙基]碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC或EDAC)為零長度的交聯(lián)劑,用于將羧基偶聯(lián)到伯胺上。該交聯(lián)劑已用于多種應(yīng)用中,例如在肽合成中形成酰胺鍵,將半抗原連接載體蛋白以形成免疫原,通過5'磷酸基團(tuán)標(biāo)記核酸并創(chuàng)建生物分子的胺反應(yīng)性NHS-酯。EDC與羧基反應(yīng)形成胺反應(yīng)性O(shè)-acylisourea中間體。如果該中間體不遇到胺,它將水解并再生羧基。在N-羥基磺基琥珀酰亞胺(Sulfo-NHS)的存在下,EDC可用于將羧基轉(zhuǎn)化為可與胺反應(yīng)的磺基-NHS酯。這是通過將EDC與含羧基分子混合并添加Sulfo-NHS來實(shí)現(xiàn)的。
應(yīng)用:
•結(jié)合肽和蛋白質(zhì)之間的羧基和氨基
•將半抗原偶聯(lián)免疫原性載體蛋白(例如,將肽與KLH連接)
•將肽抗原固定于親和純化抗體
•創(chuàng)建NHS活化,可與胺反應(yīng)的標(biāo)記化合物
•交聯(lián)蛋白質(zhì)到羧基包覆的珠子或表面
•用胺反應(yīng)性的NHS酯活化納米顆粒
•通過5'磷酸基團(tuán)進(jìn)行DNA標(biāo)記(請(qǐng)參閱技術(shù)提示#30)
產(chǎn)品參考:
交聯(lián)劑應(yīng)用指南-搜索該產(chǎn)品的文獻(xiàn)參考
規(guī)格
生產(chǎn)線: 皮爾斯™
交聯(lián)劑類型: 異雙功能
貼標(biāo)方法: 化學(xué)標(biāo)簽
反應(yīng)性部分: 碳二亞胺
溶解度: 水
墊片: 短
數(shù)量: 5克
內(nèi)容及儲(chǔ)存
儲(chǔ)存在-20℃。隨附濕冰。
介紹
Thermo Scientific™EDC是一種與羧基和胺反應(yīng)的零長度交聯(lián)劑。 EDC先與羧基反應(yīng)
并形成可與胺反應(yīng)的O-酰基異脲中間體,該中間體可與氨基快速反應(yīng)形成酰胺鍵,
釋放異脲副產(chǎn)物(請(qǐng)參見“其他信息”部分)。中間體在水溶液中不穩(wěn)定,
因此,兩步偶聯(lián)過程依賴于N-羥基琥珀酰亞胺來穩(wěn)定化。1,2
胺將導(dǎo)致中間體水解,羧基再生并釋放N-取代的尿素。在旁邊
反應(yīng)是形成N-?;澹ǔO抻隰然杷鶊F(tuán)中的羧基。
蛋白質(zhì)1,3
使用EDC將半抗原與載體蛋白偶聯(lián)的步驟
所需材料
•載體蛋白:2mg牛血清白蛋白(BSA),卵清蛋白(OVA)或匙孔血藍(lán)蛋白(KLH)
•偶聯(lián)緩沖液:0.1M MES(2- [N-嗎啉代]乙烷磺酸),pH 4.5-5(產(chǎn)品編號(hào)28390)
•EDC:10毫克
•半抗原:1-2mg
•Thermo Scientific™Zeba™Spin脫鹽柱(產(chǎn)品編號(hào)89891)或其他帶有柱頭的凝膠過濾柱
5-6K分子量截止
程序
1.將EDC平衡室溫。
2.將2mg凍干的BSA,OVA或KLH加入200µL偶聯(lián)緩沖液中。如果使用Thermo Scientific™Imject™
載體蛋白,用超純水復(fù)溶。
3.在500µL偶聯(lián)緩沖液中溶解2mg的肽或半抗原,然后將其添加到200µL的載體蛋白中
解。
4.對(duì)于BSA或OVA偶聯(lián),將10mg EDC溶于1mL超純水中,并立即添加100μL
溶液載體-肽溶液。對(duì)于KLH偶聯(lián),將10mg EDC溶于1mL超純水中,然后
立即將50µL的該溶液添加到載體-肽溶液中。如果沉淀,進(jìn)一步減少EDC的量
發(fā)生。
5.在室溫下反應(yīng)2小時(shí)。
6.使用脫鹽柱純化結(jié)合物。如果將免疫原保存了幾天以上,請(qǐng)無菌過濾
結(jié)合并儲(chǔ)存在4°C或-20°C的無菌容器中。
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