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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品簡介
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌，它能夠
感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個(gè)別裸子植物。K599 發(fā)根農(nóng)桿菌（NCPPB2659）含
有 pRi2659 農(nóng)桿堿型 Ri 質(zhì)粒，具有廣泛的宿主范圍（葫蘆科，豆科，茄科等），同時(shí)具有鏈m素
抗性。本公司生產(chǎn)的 K599 化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pCAMBIA2301
質(zhì)粒（卡那m素
抗性）檢測，轉(zhuǎn)化效率≥ 103 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
K599
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 ×100 μL
100 ×100μL
定制
基因型：Agrobacterium rhizogenes (StrR ) pRi2659 (agropine type)
存儲條件
-80 ℃保存; 請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除農(nóng)桿堿型 Ri 質(zhì)粒 pRi2659 外，無外源質(zhì)粒 DNA 殘留
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥103 cfu/μg。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，在手心融化成冰水混合物，置于冰水浴中；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，用手撥管底混勻，依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分
鐘（或干冰乙醇浴和-80℃冰凍）、37 ℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘；
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基，于 28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時(shí)；
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板
上，倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. K599 具有鏈m素抗性，不可用于具有鏈m素抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。
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