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Stbl2感受態(tài)

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  • 型號(hào) CC96133
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2024-11-04 13:01:07瀏覽次數(shù):147

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨    
Stbl2 菌株來(lái)源于大腸桿菌 JM109 菌株,適合于克隆含不穩(wěn)定序列(如正向重復(fù)序列、反向重復(fù)序
列、逆轉(zhuǎn)錄病毒的序列等)。另外,mcrA基因的突變和 mcrBC-hsdRMS-mrr基因缺失使得該菌株更
適于克隆甲基化的基因組序列;同時(shí) Stbl2 也可用于慢病毒載體的構(gòu)建。該菌株中 recA1 和 endA1
的突變有利于克隆 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提取。Stbl2 感受態(tài)

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Stbl2 菌株來(lái)源于大腸桿菌 JM109 菌株,適合于克隆含不穩(wěn)定序列(如正向重復(fù)序列、反向重復(fù)序
列、逆轉(zhuǎn)錄病毒的序列等)。另外,mcrA基因的突變和 mcrBC-hsdRMS-mrr基因缺失使得該菌株更
適于克隆甲基化的基因組序列;同時(shí) Stbl2 也可用于慢病毒載體的構(gòu)建。該菌株中 recA1 和 endA1
的突變有利于克隆 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提取。Stbl2 感受態(tài)細(xì)胞的平板生長(zhǎng)優(yōu)條件
是 30 ℃Stbl2 感受態(tài)細(xì)胞中包含有 α 互補(bǔ)序列的質(zhì)粒,所以本宿主菌株不能被用于藍(lán)白斑篩選實(shí)
驗(yàn);本菌株也不耐受 ccdB 毒性。經(jīng) pUC18 轉(zhuǎn)化檢測(cè),Stbl2 感受態(tài)細(xì)胞的效率可達(dá) 10cfu/μg DNA
產(chǎn)品組成
組分
Stbl2 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:FendA1 glnV44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 Δ(lac-proABmcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) λ-
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存;請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
產(chǎn)品特性
-屬于大腸桿菌 株系列,主要用于目標(biāo)基因的克隆和質(zhì)粒的保存;不可用于以 T7 RNA 聚合酶為
表達(dá)系統(tǒng)的蛋白表達(dá);
-該菌株適合克隆不穩(wěn)定插入片段,甲基化的基因組序列,以及慢病毒載體的構(gòu)建。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥10cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動(dòng),熱激 90 s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入900 μL LBSOC培養(yǎng)基(室溫或37 ℃預(yù)熱)然后置于37 ℃搖床復(fù)壯45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。


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