目錄:漠寶(廈門)生物科技有限公司>>技術(shù)服務(wù)>> 病毒包裝服務(wù)
干擾/敲除慢病毒(三保一)價格:5998元
過表達(dá)慢病毒價格:2800元起
服務(wù)優(yōu)勢
1、更多準(zhǔn)現(xiàn)貨最快1-2周交付1ml,高滴度病毒
2、病毒穿梭載體齊全,各種標(biāo)簽和啟子PEG,高速,層析等多種純化方式
3、完善的快速的售后體系,解決后顧之憂,不成功不收任何費用
4、病毒使用無憂,保證蛋白水平明顯變化
慢病毒使用說明
準(zhǔn)備貼壁細(xì)胞:第1天,在24孔培養(yǎng)板(以此為例)接種若干孔,每個孔內(nèi)接種3~5×10的4次方個目的細(xì)胞,以便進(jìn)行病毒感染時細(xì)胞的融合度約為70%。
第2天,觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如細(xì)胞狀態(tài)較好則開始侵染。
病毒侵染:取出-80C的儲存的病毒,在冰上融化后,瞬時離心。使用含血清、不含抗生素的培養(yǎng)基,根據(jù)MOI配制慢病毒稀釋液(可設(shè)置不同MOI)。根據(jù)需要添加Polybrene,添加時需要設(shè)置合適的濃度吸去原細(xì)胞培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)基,添加配制好的慢病毒稀釋液。混勻后放于二氧化碳培養(yǎng)箱(37°C、5%的二氧化碳)孵育過夜。
去除病毒:第3天,更換培養(yǎng)液。一般在24小時候內(nèi)將含有慢病毒的培養(yǎng)液更換成正常培養(yǎng)液;如果侵染對細(xì)胞有明顯毒性作用而影響細(xì)胞生長狀態(tài),可以在8-12小時更換培養(yǎng)液。
檢測結(jié)果:第4天,帶熒光標(biāo)簽的慢病毒可通過倒置熒光顯微鏡進(jìn)行侵染效果評估;帶螢火蟲熒光素酶標(biāo)簽的病毒可通過熒光素酶實驗進(jìn)行侵染效果評估:也可通過qPCR或WB進(jìn)行侵染效果評估。
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