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hct116/L人結(jié)腸癌耐奧沙

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

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更新時間:2025-02-11 14:40:12瀏覽次數(shù):68次

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細(xì)胞系特征

細(xì)胞株名稱:HCT116/L人結(jié)腸癌耐細(xì)胞株

種屬:人

組織來源:結(jié)腸癌

生長特性:貼壁生長

形態(tài)特征:上皮細(xì)胞

微生物及支原體檢測:陰性

安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。

培養(yǎng)條件:

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+2000ng/ml L

血清我們推薦用:

GIBCOFBS-10099-141HYCLONEFBS-SH30084.03。

培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%

傳代方法:

收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況。

(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

()如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細(xì)胞脫落后,加入2ml 以上培養(yǎng)基中止消化。

3. 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的次傳代一般是一傳二。

注:1、觀察細(xì)胞在低倍鏡(45X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請在10X20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請及時與我們聯(lián)系。..

凍存方法:

凍存液:90%胎牛血清,10%DMSO

儲存:液氮儲存

choriomeningitis virus infection [ 10]. Autophagy activity may increase at the peak of CD8+ Teff responses, suggesting that autophagy could play an important role during the transition from Teff to T memory (Tmem) CD8+ cells [10]. Both studies also linked defects in CD8+ T cell memory formation to failure to induce metabolic switches, namely the upregulation of fatty acid oxidation, which is key to CD8+ T cell memory formation [10, 52, 84].

gure 1. Mechanism of autophagy in T cells

TCR-induced expression of IL-2 leads to activation of the IL-2 receptor (IL-2r),which leads to the activation of autophagy in T helper cells in a JAK1.3-dependent manner. The initiation of autophagy and formation of the limiting membrane and thenphagophore are driven by

two complexes: the ULK-complex—ULK/FIP200/Atg101/Atg13; and the Beclin-1/Vps34 complex (class III phosphatidylinositol-3-kinase complex (PI3KC3) containing Beclin-1,

Vps34,Vps15,Atg14 and Ambra1). Two cascades of ubiquitin-like conjugation systems

regulate the elongation and maturation of the denovo formed double-membrane vesicle to form the autophagosome, which eventually fuses with the lysosome to degrade cargo. The lipidation of LC3 to PE allows association with the membranes of the autophagosome. This allows specific substrates to be targeted to the autophagosome by interaction with LC3 via LC3-interacting motifs as well as autophagic cargo receptors with LC3-interacting regions. The specific sequestration and degradation of substrates complements in-bulk mechanisms of degradation of organelles, macromolecules (i.e. proteins, lipids, glycogen),and other

cellular components.

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