人脂肪間充質(zhì)干細胞（P2代）產(chǎn)品信息：  

 人脂肪間充質(zhì)干細胞（P2代）產(chǎn)品特性：

本產(chǎn)品經(jīng)過中國食品藥品檢定研究院檢定，檢定項目包括細胞鑒別試驗、無菌檢查、分枝桿菌檢查、支原體檢查、細胞內(nèi)外病毒因子檢查、免疫學反應檢測、生物學效力檢測、細胞活性檢測、成瘤性檢查等300余項，結(jié)果符合國家食藥監(jiān)發(fā)布的《細胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導原則》的標準要求。  

注意事項：  

在無菌條件下處理該產(chǎn)品；  

為確保培養(yǎng)效果，建議配套使用本公司專用的、凍存液等配套試劑；該產(chǎn)品科研使用，使用代次建議不要超過P10代。  

產(chǎn)品保存：   

收到產(chǎn)品后，檢查產(chǎn)品是否有破損及是否處于凍存狀態(tài)。若處于凍存狀態(tài)，立即放置于-80℃的深低溫。    

冰箱或液氮中保存；若已解凍，請拍照記錄向廠家反饋情況再進行廢棄。  

收到產(chǎn)品后，請立即放置于-80℃的深低溫冰箱或液氮中至少3d后再進行復蘇操作，以保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性和細胞活率。  

產(chǎn)品復蘇：   

開啟水浴鍋預熱至37℃，干細胞專用培養(yǎng)基提前預熱至25℃左右；  

無菌條件下，吸取10ml專用培養(yǎng)基加入到15ml離心管中備用；  

從低溫容器中取出凍存管，立即置于水浴中來回迅速搖晃，直至凍存液解凍，此過程控制在2min以內(nèi)。 

注意：  

①盡可能避免水沒過凍存管帽，建議用鑷子夾住凍存管連續(xù)晃動，以降低污染的風險  

②2min內(nèi)務必完成細胞復蘇過程，時間過久會導致復蘇細胞活率較差，無法貼壁  

待細胞凍存液解凍，用75%酒精擦拭凍存管的外壁后拿入超凈臺內(nèi)

無菌條件下，迅速將細胞懸液轉(zhuǎn)移至含有10ml專用培養(yǎng)基的離心管中，用移液管輕柔吹打混勻細胞后進行接種，按照(1-1.5)Ⅹ104cell/cm2的密度進行接種(例如：100萬/管細胞可接種至3個T-25培養(yǎng)瓶中或1個T-75培養(yǎng)瓶中)  

注意：  

①由于剛復蘇的細胞比較脆弱，請勿離心處理，整個操作過程保持輕柔  

②為了保證復蘇培養(yǎng)效果，推薦使用Corning等國際的培養(yǎng)瓶/皿  

將培養(yǎng)瓶/皿置于平面上，輕柔上下左右十字搖晃5次，使細胞懸液均勻分布于培養(yǎng)瓶/皿中；在培養(yǎng)瓶/皿上方標識好細胞信息，轉(zhuǎn)移至5%CO2、37℃、濕度為95%的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

注意：為了保證貼壁效果，2h請勿移動培養(yǎng)瓶/皿  

24h后進行全量換液處理，之后每隔2天換液一次；當細胞匯合度達到80-90%時，進行傳代處理