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武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

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2021
09-10

腫瘤組織源性的原代細胞培養(yǎng)
概述腫瘤細胞的原代培養(yǎng)與正常細胞的原代培養(yǎng)的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養(yǎng)基，10%血清濃度即可，在原代培養(yǎng)時需加入原代細胞培養(yǎng)的特制添加物，或原患者血清（1%-2%）以利細胞生長。用細胞生...
2021
09-09

細胞生物學發(fā)展史
1677年荷蘭AntonievanLeeuwenhoek（1632－1723）顯微鏡學家、微生物學，用簡單顯微鏡觀察到動物的“精蟲”（細胞）。1665年英國HookeRobert（1635-1703）...
2021
09-09

什么是無血清培養(yǎng)基？
無血清培養(yǎng)基(serumfreemedium,SFM):是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。簡單地認為是體外細胞培養(yǎng)過程中的細胞培養(yǎng)基中不含有動物或人的血清，稱為無血清細...
2021
09-09

什么是傳代細胞培養(yǎng)？
原代細胞或細胞株或細胞系需在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的原代細胞或細胞株或細胞系或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)，這個過程體外培養(yǎng)稱為傳代細胞培養(yǎng)。一般認為，細胞培養(yǎng)形成單層匯合，...
2021
09-09

細胞培養(yǎng)的倍增和細胞培養(yǎng)的代數
細胞培養(yǎng)的倍增是培養(yǎng)物中細胞總數加倍，通常是指細胞指數或對數生長期。細胞培養(yǎng)的代數是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出，傳代培養(yǎng)過程的次數，傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。PriCells提供...
2021
09-09

原代細胞的概述
在大多數人的印象中，原代細胞培養(yǎng)是一件很困難的事；*自己動手可能確實如此，但市場上那么多的原代細胞培養(yǎng)體系，相當程度上可以為你解除后顧之憂。原代細胞的質量取決于多個因素：組織、培養(yǎng)基、特別是它還與實驗...
2021
09-07

什么是原代細胞、細胞株、細胞系？
原代細胞(primarycell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞，稱為原代細胞。一般認為，培養(yǎng)的原代的第1代細...
2021
09-07

腫瘤原代細胞鑒定技術
一、形態(tài)學鑒定1.在倒置顯微鏡中直接觀察活細胞的形態(tài)學特征2.細胞染色檢查：a)將無菌玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，加細胞懸液后培養(yǎng)；b)待細胞長滿玻片后取出，用PBS清洗，之后放于載玻片上，待其自然干燥；c...
2021
09-07

原代細胞計數技術
1、準備計數板：用酒精清潔計數板及專用蓋玻片，然后輕輕拭干。2、制備細胞懸液：用消化液分散單層培養(yǎng)細胞或直接收集懸浮培養(yǎng)細胞，制成單個細胞懸液。要求細胞密度不低于104/ml，若細胞數很少，應將懸液離...
2021
09-07

原代細胞染色技術
一．臺盼藍染色（1）制備單個細胞懸液，并作適當稀釋（106細胞/ml)。（2）染色：取9滴細胞懸液移入小試管中，加一滴0.4%臺盼藍溶液，混勻。（3）計數：在3分鐘內，用血球計數板分別計數活細胞和死細...
2021
09-07

原代細胞復蘇技術
1、取出細胞，迅速放入37℃溫水中快速解凍。2、吸出細胞懸液，并加10倍以上培養(yǎng)液。3、1000r/分鐘離心5分鐘，去除上清。4、用培養(yǎng)液適當稀釋后接種培養(yǎng)瓶，放入37℃CO2培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。鏡檢細胞...
2021
09-06

原代細胞凍存技術
1、選用生長情況好，數量較多的原代細胞，凍存前一天換液一次。2、貼壁細胞需用0.25％胰酶常規(guī)消化將細胞消化下來，將細胞懸液收集至離心管中。3、1000rpm離心5分鐘，棄上清液。4、沉淀加含DMSO...
2021
09-06

原代細胞無血清培養(yǎng)技術
1、棄去培養(yǎng)基廢液。2、消化：加入1ml0.125％胰酶溶液，轉動培養(yǎng)瓶使酶液浸沒瓶底，溫浴消化2-3分鐘。3、終止：用無血清培養(yǎng)基終止酶反應。4、離心：收集中和了的培養(yǎng)液，于15ml的離心管中100...
2021
09-06

原代細胞傳代技術
一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養(yǎng)瓶，使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養(yǎng)瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發(fā)...
2021
09-06

原代細胞培養(yǎng)技術
一、組織塊直接培養(yǎng)法1、取材，用Hank's液洗滌三次，并剔除脂肪，結締組織，血液等雜物。2、用手術剪將組織剪切成1mm3左右的小塊，再用Hank's液洗三次。3、將組織塊轉移至培養(yǎng)瓶，并貼附于瓶底面...
2021
09-06

原代細胞鑒定技術
一、形態(tài)學鑒定1.在倒置顯微鏡中直接觀察活細胞的形態(tài)學特征2.細胞染色檢查：a)將無菌玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，加細胞懸液后培養(yǎng)；b)待細胞長滿玻片后取出，用PBS清洗，之后放于載玻片上，待其自然干燥；c...
2021
08-30

原代細胞分離技術
取人或動物體內（或胚胎）的組織，將其剪碎至1mm3的組織塊，再采用的如下方法進行分離培養(yǎng)：一、懸浮細胞的分離方法1、將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中，1000rpm/分鐘離心5分鐘。2、...

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