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細(xì)胞外泌體研究

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更新時間:2024-07-18 16:51:55瀏覽次數(shù):2158次

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外泌體(Exosome)主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,直徑約為30-150nm,密度1.13-1.21g/mL。外泌體中攜帶有蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA和脂質(zhì)成分等。外泌體天然存在于各種體液中,例如:血液、唾液、尿液等,且培養(yǎng)的細(xì)胞也可分泌外泌體。我司可為廣大科研用戶在細(xì)胞外泌體研究方面提供助力!

一、細(xì)胞外泌體研究介紹

1、外泌體簡介

外泌體(Exosome)主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,直徑約為30-150nm,密度1.13-1.21g/mL。外泌體中攜帶有蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA和脂質(zhì)成分等。外泌體天然存在于各種體液中,例如:血液、唾液、尿液、腦脊液和母乳。且體外培養(yǎng)的細(xì)胞也可分泌外泌體。

圖片

隨著對外泌體生物來源、物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細(xì)胞間信號傳導(dǎo)以及分布的研究,發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。例如,腫瘤細(xì)胞分泌的外泌體能夠介導(dǎo)血管再生、腫瘤細(xì)胞增殖及免疫逃逸;而樹突狀細(xì)胞源性外泌體則能夠引起機體有效的抗腫瘤免疫應(yīng)答。因此,外泌體的功能取決于其來源的細(xì)胞類型,其可參與到細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、機體免疫應(yīng)答、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、腫瘤侵襲等過程。
外泌體能夠攜帶功能性蛋白及核酸分子,穿過生物屏障在細(xì)胞間傳遞,發(fā)揮重要的細(xì)胞通訊功能。因此,在未來,外泌體有望在疾病診斷、疾病給藥途徑及基因治療載體方面發(fā)揮重要的應(yīng)用價值。


2、外泌體提取
外泌體是由活細(xì)胞分泌的一種亞細(xì)胞成分,含有磷脂雙分子的膜性分子,依據(jù)其形態(tài)學(xué)和理化性質(zhì)有不同的外泌體提取方法。目前,外泌體提取的方法有:超速離心法、磁珠免疫捕獲法、沉淀或過濾法。目前,采用較多的是超速離心法和試劑盒法。其中,超速離心法依舊是從生物體液或細(xì)胞上清中分離外泌體的金標(biāo)準(zhǔn)方法。

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3、外泌體鑒定

1. 利用納米顆粒跟蹤分析(NTA)分析外泌體濃度和粒徑;
2. 利用透射電鏡(TEM)分析外泌體大小和形態(tài);
3. 利用流式細(xì)胞儀分析外泌體細(xì)胞表面標(biāo)記(CD9/CD81/CD63);
4. 通過Western blot(WB)鑒定外泌體marker(CD9/CD81/CD63)。



4、外泌體分析

1. 利用qPCR / 高通量測序等進(jìn)行外泌體mRNA / miRNA / lncRNA / circRNA表達(dá)分析;

2. 利用Label-free / iTRAQ / TMT / SDS-PAGE / WB進(jìn)行外泌體蛋白質(zhì)表達(dá)分析;

3. 通過外泌體注射動物 / 皮下荷瘤 / 活體成像等進(jìn)行外泌體動物功能研究;

4. 通過細(xì)胞增殖 / 細(xì)胞凋亡 / 細(xì)胞周期 / 細(xì)胞遷移/侵襲等進(jìn)行外泌體細(xì)胞水平功能檢測;

5. 利用雙熒光素酶報告基因檢測進(jìn)行外泌體miRNA靶基因驗證研究;

昆盟生物為助力細(xì)胞外泌體研究,可為廣大科研用戶提供外泌體提取、鑒定、分析及整體科研方案設(shè)計。詳詢我司業(yè)務(wù)員?。?!


二、細(xì)胞功能研究相關(guān)檢測

  • 細(xì)胞傳代培養(yǎng)和形態(tài)觀察
  • 3D細(xì)胞培養(yǎng)和形態(tài)觀察(細(xì)胞成球培養(yǎng)/類器官培養(yǎng))
  • 原代細(xì)胞分離/培養(yǎng)/免疫熒光鑒定
  • 細(xì)胞增殖/毒性檢測(MTT 法/CCK8 法)
  • 細(xì)胞凋亡檢測(AnnexinV FITC/PI雙染流式法/Tunel法)
  • 細(xì)胞焦亡檢測(WB檢測GasderminD切割/生化檢測Caspase-1和-4活性/ELISA檢測IL-1β和-18含量)
  • 細(xì)胞周期檢測(PI染料標(biāo)記流式法)
  • 細(xì)胞遷移/侵襲檢測(劃痕法/Transwell法)
  • 流式細(xì)胞分選(流式細(xì)胞術(shù))
  • 小管形成實驗(體外血管生成實驗)
  • 細(xì)胞克隆形成實驗

  • 細(xì)胞外泌體分離與鑒定
  • 慢病毒包裝及穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選(基因過表達(dá)/敲除)
  • 電生理檢測
  • 個性化細(xì)胞功能實驗(藥物篩選等)
    細(xì)胞模型已經(jīng)于人類疾病研究和治療藥物的篩選領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用。我司可根據(jù)客戶的具體方案提供多種細(xì)胞模型的構(gòu)建及相應(yīng)的細(xì)胞功能研究相關(guān)檢測。

 

 

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細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品、細(xì)胞生物學(xué)檢測、分子生物學(xué)檢測、高通量生信分析、動物造模及檢測


三、公司簡介  

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè),坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類齊全的細(xì)胞系和多種原代細(xì)胞、質(zhì)量穩(wěn)定的細(xì)胞培養(yǎng)試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù)。本著“守正創(chuàng)新,科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)"的理念,我們以高標(biāo)準(zhǔn)塑造行業(yè)品牌,以全新視野構(gòu)建現(xiàn)代企業(yè),勇于探索和創(chuàng)新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國各省市自治區(qū),與國內(nèi)多家醫(yī)院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系,贏得了良好的市場聲譽和廣泛的認(rèn)可,我們保證將繼續(xù)為廣大科研用戶提供專業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)!細(xì)胞系(帶STR鑒定) | 原代細(xì)胞 | 細(xì)胞培養(yǎng)基 | 血清 | 細(xì)胞培養(yǎng)添加因子 | 標(biāo)記細(xì)胞 | 耐藥細(xì)胞 | 生化檢測試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等;ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 16S rRNA測序分析 | Pull down實驗 | RIP 實驗 | ChIP實驗 | Co-IP實驗 | 質(zhì)譜檢測 | WB檢測 | PCR檢測 | 細(xì)胞培養(yǎng)/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測 | micro-CT 檢測  等。更多信息,歡迎垂詢上海昆盟生物科技有限公司。

 

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