天津酶聯(lián)科興生物長期專業(yè)供應(yīng)ELISA試劑盒,產(chǎn)品種類齊全,包括人、大小鼠、牛羊馬猴等各種種屬的ELISA試劑盒。本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平

　　注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

　　產(chǎn)品名稱酶聯(lián)科興生物人免疫球蛋白EFc段受體Ⅱ檢測試劑盒

　　產(chǎn)品規(guī)格96T/48T

　　保存2-8°C

　　有效期6個(gè)月

　　產(chǎn)品說明書咨詢銷售人員獲取說明書

　　實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中兔層粘連蛋白(LN)水平。用純化的兔層粘連蛋白(LN)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入兔層粘連蛋白(LN),再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔層粘連蛋白(LN)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔層粘連蛋白(LN)含量。

　　樣品采集:

　　1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

　　2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋（如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。

　　3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

　　四、兔ELISA試劑盒檢驗(yàn)方法

　　1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。

　　2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

　　3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

　　4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。

　　5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。

　　6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。

　　7.洗滌，同步驟5。

　　8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。

　　9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）

　　兔ELISA試劑盒的自備物品:

　　1、37℃恒溫箱

　　2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

　　3、精密移液器及一次性吸頭

　　4、蒸餾水

　　5、一次性試管

　　6、吸水紙

　　樣本處理及要求:

　　1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

　　2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

　　3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

　　4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

　　5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

　　6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

　　7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

　　酶聯(lián)科興生物人免疫球蛋白EFc段受體Ⅱ檢測試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:

　　大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒

　　大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒

　　大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒

　　大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒

　　大鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒

　　大鼠素原(aGT)ELISA試劑盒

　　大鼠熱蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒

　　大鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒

　　大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒

　　大鼠熱蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒

　　大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒

　　大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒