摘要：異檸檬酸脫氫酶在TCA循環(huán)中將異檸檬酸轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸，對(duì)生物的生物體能量代謝、生物合成以及抗氧化脅迫起重要作用。

樣品收集、處理及保存方法：植物異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA檢測試劑盒

1.  樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2.  標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。

3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本：請(qǐng)1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測。

（植物處理方案）

1、 新鮮植物組織請(qǐng)?jiān)谝旱谐浞盅心ィ鐭o液氮，剪碎，玻璃勻漿器研磨也可；

2、 加入樣品體積9倍（鮮重：勻漿液體積）的提取液（0.1mmol PH7.4 PBS ）, 4℃浸提2h；

3、 請(qǐng)于4℃ ，3000rpm，離心10min，收集上清；

4、 取上清檢測。

注：標(biāo)本均應(yīng)密封保存，短期內(nèi)使用（1周左右），可4度保存；若樣本收集與實(shí)驗(yàn)時(shí)間相隔較長，務(wù)必保存在-20或-80度，盡量不要超過半年，同時(shí)避免反復(fù)凍融。

上海軒澤康生物擁有自己的實(shí)驗(yàn)室和技術(shù)團(tuán)隊(duì)，公司免費(fèi)提供ELISA代測服務(wù)，并提供售前、售中、售后技術(shù)支持。為您解決實(shí)驗(yàn)過程中遇到的問題，如需了解更多上海軒澤康生物代測服務(wù)，請(qǐng)咨詢或聯(lián)系相關(guān)客服。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被異檸檬酸脫氫酶（ICD）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的異檸檬酸脫氫酶（ICD）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

注意事項(xiàng)：

1.     用戶在初次使用植物異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA檢測試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。

2.     不同批次的試劑禁止混用

3.     本公司提供的96孔酶標(biāo)板是單條可拆卸型酶標(biāo)板，用戶按需求使用；剩余的酶標(biāo)板請(qǐng)按保存條件貯存。在操作過程中避免酶標(biāo)板干燥，干燥會(huì)使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活。

4.     為避免交叉污染，避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。

5.     揭封板膜和覆蓋封板膜時(shí)應(yīng)避免用力過大導(dǎo)致液體濺出。