產(chǎn)品簡介：軒澤康豬附紅細胞體病ELISA試劑盒 定性檢測

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/盒：zui多可檢測90個樣本；48T/盒：zui多可檢測42個樣本

【保存條件】：2-8℃，避光防潮儲存

【檢測目的】：定性檢測

【實驗儀器】：酶標儀

【檢測方法】：雙抗一步夾心法

【待檢樣本】：組織勻漿、細胞上清液、血清、血漿等

【特色服務(wù)】：免費代測ELISA實驗、支持定制

檢測原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被豬附紅細胞體病IgG抗體的包被微孔中，依次加入標本、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），與CUT OFF值相比較，從而判定標本中豬附紅細胞體病（Eperythrozoonosis）的存在與否。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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軒澤康豬附紅細胞體病ELISA試劑盒 定性檢測結(jié)果判斷：

 1.  試驗有效性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；

                陰性對照孔OD值平均值≤0.15。

2.  臨界值（Cut off）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

4.  陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽性

試劑盒性能：

1.  準確性：陽性對照孔OD值平均值≥1.00；陰性對照孔OD值平均值≤0.15，說明試驗結(jié)果有效。

2.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

3.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

常見問題解答：

1.     【高背景或陰性對照值偏高】

可能的原因：陰性對照孔被陽性對照或樣品污染；抗體非特異性結(jié)合；酶結(jié)合物過濃；孵育溫度過高；底物在使用前曝光；讀板前停留時間過長

上海軒澤康生物為您提供解決方案：洗滌時勿將洗液溢出孔外；建議更換封閉液；檢查酶結(jié)合物是否按照說明書規(guī)定稀釋；檢查孵育箱的溫度是否正確、穩(wěn)定；應(yīng)保存在暗處、避光；加終止液后3分鐘內(nèi)讀數(shù)。

2.     【陽性對照值偏低或低吸光度】

可能的原因: 試劑未平衡至室溫;檢測體積偏小;孵育時間過短;底物受污染;樣本中有抑制劑。

上海軒澤康生物為您提供解決方案：實驗開始前，將試劑盒從冰箱內(nèi)取出平衡至室溫（20-25℃）；檢查移液器吸液通道是否堵塞；使用計時器，準確孵育時間；使用新配置的試劑，重新實驗；疊氮鈉會抑制HRP酶的活性。

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