【摘要】：cGMP是一種具有細(xì)胞內(nèi)信息傳遞作用的第二信使，廣泛分布于各種組織中，其含量約為（cAMP）的1/10～1/100。cGMP與cAMP的作用相反，具有多種生物效應(yīng)，包括抑制心肌收縮力、降低心率、增加神經(jīng)興奮性、刺激白細(xì)胞溶酶體釋放水解酶、刺激淋巴細(xì)胞分裂增殖、抑制糖異生以及興奮副交感神經(jīng)等。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被環(huán)鳥苷一磷酸腺苷一磷酸（cGAMP）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的環(huán)鳥苷一磷酸腺苷一磷酸（cGAMP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

大鼠(cGAMP)ELISA檢測試劑盒 定量分析組成及其配置：

大鼠(cGAMP)ELISA檢測試劑盒 定量分析操作步驟：

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。