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當(dāng)前位置:> 供求商機(jī)> 人淋巴細(xì)胞胞漿蛋白1(LCP1)ELISA檢測(cè)試劑盒
貨物所在地:上海上海市
更新時(shí)間:2024-11-13 21:00:07
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檢測(cè)原理:人淋巴細(xì)胞胞漿蛋白1(LCP1)ELISA檢測(cè)試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被淋巴細(xì)胞胞漿蛋白1(LCP1)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的淋巴細(xì)胞胞漿蛋白1(LCP1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:
1. (96T/48T)打開(kāi)包裝后請(qǐng)及時(shí)檢查所有物品是否齊全。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:0、10、20、40、80、160 ng/mL
3. 請(qǐng)?zhí)崆?20 分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
4. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象;放置室溫,輕搖均勻,待結(jié)晶溶解后再配置洗滌液??蓪?20ml 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml 工作濃度的洗滌液,未用完的放回4℃
5. 20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20 稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加 19 份蒸餾水。
樣本收集、處理以及保存方法:
【組織勻漿】:用預(yù)冷的 PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱(chēng)重后將組織jian碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
【細(xì)胞培養(yǎng)物上清】:請(qǐng) 1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?span>-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
【樣品保存】:樣品收集后若在1 周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的可保存于4℃,若不能及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1 個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),或-80℃(6 個(gè)月內(nèi)檢測(cè)),避免反復(fù)凍融,標(biāo)本溶血會(huì)影響最后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
上海軒澤康生物人淋巴細(xì)胞胞漿蛋白1(LCP1)ELISA檢測(cè)試劑盒售后保障:
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