材料和設(shè)備

• 細胞：你想要培養(yǎng)的細胞系或原代細胞。
• 培養(yǎng)基：適合你細胞類型的培養(yǎng)基，包含必要的營養(yǎng)物質(zhì)和血清。
• 玻片：通常使用蓋玻片或?qū)ｉT的細胞培養(yǎng)玻片。
• 細胞培養(yǎng)皿：用于培養(yǎng)細胞的容器。
• 顯微鏡：用于觀察細胞。
• 移液器和移液管：用于精確移液。
• 無菌操作臺：用于無菌操作。
• 培養(yǎng)箱：通常為37°C，5% CO?的環(huán)境。

步驟

1. 準備玻片：
• 清潔玻片：使用酒精或其他適當?shù)那鍧崉┣鍧嵅Ｆ?，確保無塵無菌。
• 消毒玻片：將玻片放入70%酒精中浸泡，然后在無菌操作臺中晾干。
• 處理玻片（可選）：某些細胞可能需要玻片表面進行處理以促進細胞附著，如使用膠原蛋白或明膠涂層。
2. 細胞準備：
• 從培養(yǎng)瓶或冷凍保存中取出細胞，并在適當?shù)呐囵B(yǎng)基中復蘇。
• 通過離心或胰蛋白酶消化收集細胞，制備細胞懸液。
• 計數(shù)細胞，調(diào)整細胞懸液的濃度。
3. 種植細胞：
• 將適量的細胞懸液（通常為幾百微升到幾毫升，具體取決于細胞密度和玻片大小）加入到培養(yǎng)皿中。
• 將處理過的玻片輕輕放入培養(yǎng)皿中，確保玻片表面與細胞懸液接觸。
• 輕輕搖動培養(yǎng)皿，使細胞均勻分布。
4. 培養(yǎng)：
• 將培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱中，通常在37°C，5% CO?的環(huán)境中培養(yǎng)。
• 根據(jù)細胞類型和實驗需求，培養(yǎng)時間可以從幾小時到幾天不等。
5. 觀察和維護：
• 定期使用顯微鏡觀察細胞的生長情況。
• 根據(jù)需要更換培養(yǎng)基，以保持細胞的健康生長。
• 如果細胞過度生長，可以進行傳代培養(yǎng)。

注意事項

• 無菌操作：在整個過程中，確保所有操作都在無菌條件下進行，以防止污染。
• 細胞密度：根據(jù)細胞類型和實驗需求，調(diào)整細胞種植的密度。
• 玻片處理：某些細胞可能需要特定的玻片表面處理以促進附著和生長。
• 培養(yǎng)條件：根據(jù)細胞類型，調(diào)整培養(yǎng)箱的溫度和CO?濃度。