很多初接觸色譜領(lǐng)域的朋友對制備色譜這個名詞比較陌生。其實,半制備色譜在化學化工醫(yī)藥等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是zui為典型的制備色譜,換句話說,將分析色譜的進樣量增大,同時得出大量的所需物質(zhì)(餾分)的過程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質(zhì)的含量。半制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì)。而制備色譜系統(tǒng)則是利用制備色譜的思想能得到純化物質(zhì)的多個分析測試設備聯(lián)用的總稱。右圖便是一套典型的制備色譜系統(tǒng)。
半制備色譜由于不需要固體支撐體,物質(zhì)的分離依據(jù)其在兩相中分配系數(shù)的不同而實現(xiàn),因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等,不僅使樣品能夠全部回收,回收的樣品更能反映其本來的特性,特別適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質(zhì)與液態(tài)固定相之間能夠充分接觸,使得樣品的制備量大大提高,半制備色譜是一種理想的制備分離手段。
半制備色譜相對于傳統(tǒng)的固—液柱色譜技術(shù),具有適用范圍廣、操作靈活、、快速、制備量大、費用低等優(yōu)點。HSCCC 技術(shù)正在發(fā)展成為一種備受關(guān)注的新型分離純化技術(shù),已經(jīng)廣泛應用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領(lǐng)域, 特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認為是一種有效的新型分離技 術(shù);適合于中小分子類物質(zhì)的分離純化。
傳統(tǒng)的制備色譜一般由一臺可以連續(xù)輸送液體的恒流泵、紫外檢測儀與色譜柱構(gòu)成,其中zui重要的部件是價格不一,款式多樣的色譜柱,這也是影響zui終制備效果的關(guān)鍵性環(huán)節(jié)。柱子有多種類型,不僅材質(zhì)不一,填料也有很多學問,下面簡要的說說關(guān)于柱子的一些情況:
各種規(guī)格的玻璃柱子在實驗室里頭很容易得到,而且價格低廉,但玻璃柱子致命的弱點是它能承受的壓力很小,且非常容易破碎。當由于壓力太小而導致流動相流速很慢的時候,高位液面或加高壓空氣(或者氮氣)的采用是一個簡單的解決辦法。在底下加真空,也能在一定程度上解決這個問題。
半制備色譜具有良好的耐腐蝕、抗壓力性能,但其價格相對很貴。如果,半制備色譜只有很小的分離任務且經(jīng)費也允許,市面上直徑為1cm的小型制備柱就是。
有機玻璃柱子也能抗壓力耐腐蝕,相對不銹鋼柱子而言,它是半透明的,可以看到液體的運行狀態(tài),對有色的物質(zhì)其特點就更為突出。