檢測水產(chǎn)呋喃它酮(AMOZ)ELISA法檢測試劑盒
【簡單介紹】
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【詳細說明】
呋喃它酮(AMOZ)ELISA法檢測試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
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食品中肉質(zhì)類瘦肉精系列檢測:微生物、化學(xué)有害物質(zhì)、抗生素、水產(chǎn)、真菌毒素、獸藥殘留等
動物疫病系列檢測:牛羊豬犬禽病
化妝品系列檢測:重金屬
保健品系列檢測:非法藥類添加劑
農(nóng)藥殘留系列檢測:糧食中農(nóng)藥殘留
呋喃它酮(AMOZ)ELISA法檢測試劑盒
原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測蜂蜜、魚、蝦、禽、肝臟等中的呋喃它酮代謝物(AMOZ),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的呋喃它酮代謝物和酶標板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗呋喃它酮代謝物抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含呋喃它酮代謝物含量成負相關(guān),與標準曲線比較即可得出樣本中呋喃它酮代謝物的殘留量。
2 技術(shù)指標
2.1 試劑盒靈敏度:0.05ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:25℃,45min~15min
2.3 檢測下限:
組織、肝臟…………………………0.1ppb
蜂蜜、牛奶、腸衣…………………0.1ppb
奶粉、蛋粉、飼料…………………0.1ppb
魚/蝦等水產(chǎn)品組織因有一定干擾,定量下限為0.15ppb
5.3.1 牛奶樣本處理方法
1)取5ml樣本于離心管中,加250ul 亞硝基溶液(配液1)振蕩混合30秒,加250ul 硫酸鋅溶液(配液2)振蕩混合30秒,15℃4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;
2)取上清1.1ml,加4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
3)在37℃過夜孵育(約16小時)或50℃(超過50℃時會影響分層效果)水浴孵育3小時;
4)分別加入5ml 0.1M K2HPO4 溶液,0.4ml 1M NaOH溶液和5ml的乙酸乙酯,振蕩5分鐘;
5)室溫下4000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘;
6)取出2.5ml的上層液到另一個離心管中,50-60℃氮氣或空氣吹干;
7)用1ml正已烷溶解殘留物,加入1ml復(fù)溶工作液充分振蕩混合30秒;室溫4000轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘;
8)去除上層正已烷,取50μl下層液用于分析。
樣本稀釋倍數(shù)為2 檢測下限:0.1ppb
5.3.2 奶粉、蛋粉樣本處理方法
1)稱取1±0.05g均質(zhì)樣于離心管中,加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
2)在37℃過夜孵育(約16小時)或50℃(超過50℃時會影響分層效果)水浴孵育3小時;
3)加250ul 亞硝基溶液(配液1)振蕩混合30秒,加250ul 硫酸鋅溶液(配液2)振蕩混合30秒,15℃4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘;
4)取全部上清到另一個離心管中,后續(xù)接“5.3.1 牛奶樣本處理方法,4)”
5.3.3 蜂蜜、組織、腸衣、肝臟、飼料、雞蛋樣本處理方法
1)稱取1±0.05g均質(zhì)樣于離心管中,加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
2)后續(xù)接“5.3.1 牛奶樣本處理方法,3)”
5.3.4 熟食樣本處理方法
1)稱取1±0.05g均質(zhì)樣于50ml離心管中,加入4.5ml甲醇和0.5ml去離子水,振蕩2min,室溫4000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘,去除全部液體;
2)加入5ml乙氰和5ml正己烷,振蕩2min,室溫4000轉(zhuǎn)/分,離心5分鐘,去除全部液體;
3)在沉淀中加入4ml去離子水、0.5 ml 1M 鹽酸溶液和100μl衍生化試劑,振蕩5分鐘;
8 注意事項
8.1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會導(dǎo)致所有標準的OD值偏低。
8.2 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會出現(xiàn)標準曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
8.3 混合要均勻,洗板要*,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的*性。
8.4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。
8.5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
8.6 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標準的吸光度值小于0.5個單位(A450nm< 0.5 )時,表示試劑可能變質(zhì)。
8.7 反應(yīng)終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。
9 貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,避免冷凍。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒
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