S-180細胞，小鼠肛門肉瘤細胞   培養(yǎng)需注意：

細胞培養(yǎng)實驗所需的物品、器材應進行嚴格的滅菌或購買無菌的一次性物品。玻璃瓶可擰松瓶蓋滅菌（指高壓蒸汽滅菌，以下同）或用鋁箔紙包住瓶口，和瓶蓋分別滅菌。其它玻璃和金屬器材用鋁箔紙包裹進行滅菌。玻璃吸管應塞上棉花球滅菌，然后置于烘箱中烘干。不適于進行高壓滅菌的瓶塞等其它物品，可浸泡在70%酒精中進行滅菌，然后在超凈工作臺上吹干。細胞培養(yǎng)液和其它不適于高壓滅菌的溶液，應通過過濾（采用0.22μm的孔徑的濾膜）滅菌。無菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖地面一次，并用紫外線照射滅菌30分鐘。超凈工作臺每次使用前用70%酒精擦拭，然后紫外線照射30分鐘。

進入無菌操作室要求穿著無菌工作服、工作帽、口罩。開始工作前用70%酒精對手、前臂及乳膠手套進行消毒。細胞培養(yǎng)等操作應在超凈工作臺或有空氣過濾器的空間內(nèi)進行。操作前點燃酒精燈，細胞培養(yǎng)的所有操作，如打開或關上試管或培養(yǎng)瓶蓋等，都要靠近酒精燈并經(jīng)過短時間的灼燒。燒過的實驗器械，冷卻后才能使用。已吸過培養(yǎng)液或其它有機液體的吸管不得再用火焰燒灼。不同液體分別用不同的吸管吸取，不能混用。開蓋后的培養(yǎng)瓶盡量避免垂直放置，同時瓶蓋應扣放在超凈工作臺上，以減少落入細菌的機會。細胞培養(yǎng)物在處理和使用前，不要過早暴露于空氣中。在進行轉(zhuǎn)移液體操作時，移液器不能觸及瓶口以避免細菌污染或交叉污染。放置吸管時管口向下傾斜，以防止液體倒流引起污染。培養(yǎng)細胞的廢棄用品，應放入可封裝的容器內(nèi)。

S-180細胞，小鼠肛門肉瘤細胞  的凍存

細胞凍存的原則是要逐步緩慢降溫，以避免細胞內(nèi)部形成冰晶對細胞造成傷害。
1) 貼壁細胞經(jīng)消化、離心收集，懸浮細胞經(jīng)離心收集；
2) 大約10⁶個細胞加入1ml凍存液（細胞培養(yǎng)液和10%DMSO），用吸管吹打，使細胞分散成單細胞懸液；
3) 加入到凍存管中。如用1.8ml的凍存管，每管不要加入超過1.5ml的細胞懸液；
4) 在凍存管上標明細胞名稱及凍存日期；
5) 用厚布或衛(wèi)生紙包裹凍存管，置于4℃半小時，然后置于-20℃兩小時，再置于-40℃兩小時，然后置于液氮上方置夜；第二天將細胞置于液氮中；如果僅想提取細胞內(nèi)的東西可以直接放在-20度的冰箱中。
6) 記下凍存管存放的位置，作好凍存記錄。

 其他細胞：

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