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細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據傳統(tǒng)定義，*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. （1987）. Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. （New York, Alan R. Liss, Inc.）]. 這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內需掌握好細胞zui大的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的*性。

細胞系是不斷生長，分化的細胞群，因其經過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上，連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng)，隨著代數的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。

需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。

 傳代培養(yǎng)

懸浮細胞:

1.懸浮細胞常規(guī)傳代操作為半量換液，分瓶傳代，即取出一半細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的*培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；也可根據細胞密度分多瓶傳代。

2.注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。

半貼壁半懸浮細胞：

1.若懸浮細胞較多且折光率良好，可離心收集，繼續(xù)培養(yǎng)。

2.若有少量細胞懸浮，也可不用收集，傳代操作按常規(guī)貼壁細胞操作流程處理。

3.若懸浮細胞較多，離心收集，原瓶中貼壁細胞按照常規(guī)規(guī)貼壁細胞操作流程進行消化、終止消化、吹打，并與之前收集的懸浮細胞混懸，分瓶培養(yǎng)。

貼壁細胞:

1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶進行消化（注意把握消化時間，通?？刂圃?~2min）

2.鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小時去掉胰酶，加6~8 ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散；

3.取出部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的*培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%以后重復傳代操作或者凍存。

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CTLL-2;小鼠T淋巴細胞

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CHO;中國倉鼠卵巢細胞

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HL-60;人原髓細胞白血病細胞

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BCPAP；人甲狀腺癌乳頭狀細胞

H1299;人肺腺癌細胞

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L929;小鼠結締組織L細胞株929克隆

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Pfeiffer；人彌漫性大細胞淋巴瘤B淋巴細胞

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