人生長激素釋放因子(GH-RF)試劑盒
人生長激素釋放因子(GH-RF)試劑盒是用于檢測生物樣本中 GH - RF 含量的工具,以下為你詳細介紹:
檢測原理
ELISA 試劑盒:通常采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗。用純化的 GH - RF 抗體包被微孔板,加入樣本后,樣本中的 GH - RF 與固相抗體結合,再加入 HRP 標記的 GH - RF 抗體,形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物,加入底物 TMB,經 HRP 催化顯色,顏色深淺與 GH - RF 含量正相關,通過酶標儀測 OD 值計算含量。
放免藥盒:利用人血清中樣品 GH - RF 與其示蹤物如 125I - GHRH 與特異性 GHRH 抗體競爭結合反應,形成 125I - GHRH - GHRHAb、GHRH - GHRHAb 復合物,加入分離劑分離出復合物,測定復合物中的放射性計數,從而求出樣品中 GHRH 的濃度。
主要類型
ELISA 試劑盒:常見品牌有上海紀寧實業(yè)、上海古朵生物等,具有操作相對簡便、靈敏度較高、特異性較好等特點,可用于定量檢測。
放免藥盒:如 MitcSciences 的促生長激素釋放激素放免藥盒,利用放射性標記原理,具有靈敏度高的特點,可用于定性或定量測定。
組成成分
ELISA 試劑盒:一般包含酶聯(lián)板、標準品、樣品稀釋液、生wu素標記抗體、辣根過氧化物酶標記親和素、底物溶液、濃洗滌液、終止液等。
放免藥盒:通常有 GHRH 標準品、125I - GHRH、GHRH 抗體、緩沖液、分離劑 (第二抗體) 等。
樣本要求:血清、血漿、細胞上清液、組織勻漿等皆可。
操作流程
ELISA 試劑盒:先將試劑混勻,根據樣品和標準品數量確定板條數,加樣后依次進行溫育、洗滌、加親和鏈酶素 - HRP、溫育、洗滌、加底物、加終止液操作,最后在 450nm 波長處測 OD 值。
放免藥盒:按照特定加樣程序,依次加入緩沖液、零標準、標準液、樣本、抗體、125I - GHRH 等,混勻后 4℃放置 24 小時,再加入分離劑,室溫放置 15 分鐘后離心,棄上清測沉淀計數。